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小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的分子机制研究的中期报告
小菜蛾(Plutella xylostella)是世界上最为重要的十大农业害虫之一,在农业生产中对十字花科蔬菜、油菜等作物造成严重威胁。Bt杀虫蛋白是一种广泛应用于农业生产中的生物农药,其中Cry1Ac是较为常见的Bt杀虫蛋白。
然而,在长期的Bt杀虫蛋白应用后,小菜蛾对Cry1Ac出现了抗性。为探究小菜蛾对Cry1Ac抗性的分子机制,我们进行了一系列实验。
首先,我们使用荧光素酯水解法(fluorogenic esterase assays)测定了野生型小菜蛾和抗性小菜蛾的荧光素酯酶活性。结果发现,抗性小菜蛾的荧光素酯酶活性显著高于野生型小菜蛾,表明小菜蛾抗性与其酶的活性有关。
接着,我们利用RNA测序分析技术对野生型小菜蛾和抗性小菜蛾的基因表达水平进行比较。发现,抗性小菜蛾产生了一系列的差异表达基因,并且这些基因主要涉及代谢、螯合物、转运蛋白和神经传递等方面。
进一步地,我们确定了基因cytochrome P450 6AB11是与小菜蛾对Cry1Ac抗性相关的基因。通过基因敲除实验,我们发现敲除cytochrome P450 6AB11后,小菜蛾对Cry1Ac的抗性得到了明显的降低,从而证实了cytochrome P450 6AB11是小菜蛾对Cry1Ac抗性的关键基因。
综上所述,我们发现小菜蛾对Cry1Ac抗性与其酶的活性、代谢和基因表达等方面的变化密切相关,其中cytochrome P450 6AB11是关键的调控基因。这一研究结果可以为今后小菜蛾的抗性防治提供参考。
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