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;一、食品微生物质量;1、食品微生物质量指标;2、食品微生物学指标;3、食品微生物安全性指标;4、用微生物作为食品质量控制的标准;二、食品质量管理与控制体系;;四、微生物检测质控;1、检验人员;2、微生物检验室的环境条件;3、无菌室使用和管理;无菌室要设有套间或缓冲间,最好设有推拉门,以防止空气振荡;
无菌室应有良好的通风条件,如安装空调设备及过滤设备,无菌室内空气测试应基本达到无菌;;无菌室可用紫外线进行空气及工作台面消毒;
超净工作台一般采用30W紫外灯,距离工作台 30cm;
在操作前,开灯40分钟灭菌,隔15分钟后,可进入无菌室内工作;;工作人员在进入无菌室前应取下手表、首饰等物品;
工作人员入室必须穿戴室内工作服、口罩、帽子,离室时挂回原处,不得将室外工作服穿入室内;
工作人员进无菌室前用肥皂洗手,操作前用 75%酒精棉球消毒后进行微生物检验工作;实验应在酒精灯前操作。;工作结束,及时清理台面和实验用具,擦洗并用酒精棉消毒台面;
工作完毕,两手用清水肥皂洗净,必要时可用新洁尔灭、过氧乙酸泡手,然后用水冲洗;
工作完毕,对染菌带毒物品,进行消毒灭菌处理。;工作台、地面和墙壁可用0.1%新洁而灭或 0.05%过氧乙酸溶液擦洗消毒;
根据无菌室的净化情况,可酌情用2mL/m3甲醛溶液熏蒸消毒;
每个月对无菌室和超净工作台作一次空间落菌的监控测定;将琼脂平板在工作台上暴露 15min,每个平板不得超过15个菌落。;4、清洗、消毒、灭菌;实验器具的清洗消毒
新购买的玻璃器皿使用前用流水冲洗后,用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h,再用清水冲洗干净备用;
器皿使用后随时清洗,被污染的器皿应高压灭菌后再冲洗,不得乱弃乱扔;
对被沾污难以洗涤的器皿应浸泡于重铬酸钾清洗液24h后,带上乳胶手套取出,并用流水冲洗干净;;染色的玻片放入煤酚皂溶液内浸泡24h后,再用3-5%肥皂水煮沸10-15min,待冷却后再用流水洗净;
做凝集试验用的玻片或平板必须高压灭菌后再洗涤。;器皿和培养基的灭菌
检测用的玻璃器皿、金属用具和培养基(适宜时)必须经灭菌后方能使用;
所有需要灭菌的器具首先应洗净晾干,用纸包装严密并包扎好;
配制好的培养基分装并包扎好;
器具的灭菌:121℃,15min;160℃,2h;
培养基的灭菌:按培养基配制说明的规定设置。;废弃物的处理
接触病原的实验耗材和培养物等废弃物,必须经121℃灭菌30min后,方可废弃或进入排污系统;
毒理试验后的培养基,用戊二醛浸泡1h消毒后,弃于垃圾袋中;
涂片染色冲洗后的液体,一般可直接进入排污系统。;5、培养基和药品的使用与保管;培养基及试剂用水应采用蒸馏水,避免使用自来水,因自来水中的漂白粉、氯气等对微生物生长有抑制作用。
培养基、染色液和试剂配制应严格按 GB/T4789.28—2003标准规定进行操作,配制时按规定的配方和顺序添加,不得随意更改。;培养基配制好以后,应立即进行必要的灭菌处 理,一般采用湿热灭菌法,即高压蒸汽灭菌器, 121℃灭菌20min,某些含糖及特殊成份不耐热 的培养基采用115℃灭菌15~20min。
配制好的培养基应及时使用,不宜放置过久,可置4℃冰箱存放。;6、菌种管理规定;使用范围
作为验证检验准确度;
作为已知物质验证新方法、新仪器;
作为考核物质评估检验部门、检验人员的能力。;参考菌株
购买的无标准菌株号的菌株,以及实验室参加水平测试考核分离的菌株。
自行分离菌株
由本实验室鉴定后的菌株。
参考菌株、自行分离菌株的使用范围
作为培训教学之用;
作为科研、技术验证之用。;菌种保藏
应针对菌种确定适宜的保藏方法,同一菌株应选用两种或两种以上方法进行保藏;
须定期转种传代并记录。
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