木薯SBEⅠ、SBEⅡ基因RNA干扰载体的构建及农杆菌介导的遗传转化的中期报告.docxVIP

木薯SBEⅠ、SBEⅡ基因RNA干扰载体的构建及农杆菌介导的遗传转化的中期报告 本次实验旨在构建木薯(SBEⅠ、SBEⅡ)基因RNA干扰载体以及利用农杆菌介导的遗传转化技术实现对木薯基因的敲除，以研究其在淀粉合成过程中的作用。 首先，我们通过PCR扩增木薯(SBEⅠ、SBEⅡ)基因的片段，并进行酶切、连接、转化等操作，构建出相应的RNA干扰载体。为了确定构建的RNA干扰载体是否成功，我们进行了基因测序，并进行序列比对和相似性分析。结果显示，RNA干扰载体成功构建且与目标基因的序列高度吻合，具有良好的RNA干扰效应的潜力。 接着，我们将构建好的RNA干扰载体和农杆菌(LBA4404)进行共转化操作，将其导入木薯愈伤组织中，进行遗传转化。经过筛选和PCR鉴定，我们最终成功地获得10个SBEⅠ基因敲除突变体和16个SBEⅡ基因敲除突变体。这些突变体的模式和表现被详细的观察和分析。 总结来说，通过本次实验，我们成功构建了木薯SBEⅠ、SBEⅡ基因RNA干扰载体，并利用农杆菌介导的遗传转化技术实现了木薯基因的敲除。我们的研究结果将为淀粉合成的相关机制研究提供重要的实验依据。