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- 2023-09-28 发布于上海
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慢病毒介导shRNA靶向沉默VEGF-A乳腺癌细胞株的构建的中期报告
本实验旨在使用慢病毒介导shRNA技术构建靶向沉默VEGF-A的乳腺癌细胞株。在实验中,我们使用了三个不同的shRNA序列,分别为shRNA-1、shRNA-2和shRNA-3,这三个序列均针对VEGF-A基因,用于沉默其表达。
首先,我们设计并合成了三个shRNA序列,分别包含一个慢病毒载体中的H1启动子,用于驱动shRNA的表达。接着,我们将这三个shRNA序列插入到了慢病毒载体中,并通过包装细胞系制备了慢病毒。
随后,我们将慢病毒用于感染MDA-MB-231细胞株,这是一种高度侵袭性的三阴性乳腺癌细胞。我们使用空载体作为对照组,以比较不同的shRNA序列对VEGF-A表达的影响。
目前,我们已完成了感染和肿瘤细胞种植。我们预计在近期进行qPCR和Western blot实验,以检测三个shRNA序列对VEGF-A表达的影响,并评估它们对MDA-MB-231细胞增殖和侵袭能力的影响。
总的来说,本实验将为开发VEGF-A靶向治疗乳腺癌提供有力的基础数据。
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