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- 2023-09-28 发布于上海
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缺氧血管内皮细胞中的基因表达调控——RGS5和RTEF-1的作用的中期报告
目前,我们正在研究缺氧条件下血管内皮细胞中RGS5和RTEF-1蛋白的表达及其对基因表达的调控作用。我们已经完成了一些初步实验,以下是我们的中期报告。
实验设计:
我们利用体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行实验,将其分为缺氧组和正常氧组。在缺氧组中,我们使用Russell氏双氧水法(hypoxia mimicry)模拟缺氧情况,使氧气浓度降至1%。在正常氧组中,我们维持正常氧气浓度(21%)。
对于RGS5和RTEF-1的表达分析,我们采用实时荧光定量PCR(qPCR)和Western blotting两种技术。对于基因表达调控的研究,我们将细胞分为对照组、RGS5基因沉默组、RTEF-1基因沉默组和双基因沉默组,利用qPCR技术检测靶基因的表达。
中期结果:
我们的实验结果显示,在缺氧条件下,RGS5和RTEF-1的 mRNA 和蛋白表达均有所上调(如下图所示)。而在对照组中,两个基因的表达水平相对较低。此外,利用基因沉默技术后,我们发现,沉默 RGS5 或 RTEF-1 基因后,HIF-1α 的表达水平较原来有所改变。这表明RGS5和RTEF-1可能通过调控 HIF-1α 的表达来影响基因表达,而后者是重要的细胞缺氧应答分子。
结论:
综上所述,我们的中期结果表明,在血管内皮细胞中,缺氧条件下RGS5和RTEF-1的表达均受到上调,并且这两个基因可能通过调节 HIF-1α 的表达来影响基因表达。我们将进一步进行实验以深入探究这些基因在血管内皮细胞中的缺氧应答机制以及其在血管生成和相关疾病中的潜在作用。
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