金盏菊再生体系的建立和遗传转化初探的中期报告.docxVIP

金盏菊再生体系的建立和遗传转化初探的中期报告 本研究旨在建立金盏菊（Tagetes erecta L.）再生体系以及探讨其遗传转化方法。本阶段实验主要包括以下内容： 1.金盏菊愈伤组织诱导和再生体系的建立 通过对不同植物激素配比和处理时间的尝试，我们最终建立了一种高效的金盏菊愈伤组织诱导和再生体系。具体方法为将金盏菊茎段嫩枝切成2-3厘米的小段，培养于含有0.5 mg/L 1-萘乙酸（NAA）和1.0 mg/L 6- 芽酸（BA）的MS培养基中。10天后可见白色小型愈伤组织，继续改培养基组合，并将愈伤组织移至含有1.0 mg/L 乙烯基腺嘌呤（2IP）和0.1 mg/L NAA的MS培养基中。21天后，可见分化出愈伤组织的芽和根，再生植株的产生率为73.5％。 2.金盏菊基因转化的初步实验 利用农杆菌介导技术，将木瓜蛋白酶基因（papain）和广谱抗菌肽基因（AMP）构建成植物表达载体，并转化到金盏菊愈伤组织中。在Containing含有40 mg/L卡那霉素和500 mg/L头孢呋辛的选择培养基上，进行筛选。经过PCR检测和Southern杂交分析后，成功获得了9个转化株，转化率约为7.8％。进一步研究将会在后续实验中进行。 总结： 通过本阶段的研究，我们成功建立了一种高效的金盏菊愈伤组织诱导和再生体系，并尝试了基因转化技术。这为后续的金盏菊遗传转化和功能基因研究奠定了良好的基础。