大肠杆菌DNA连接酶manual v20 xin.pdfVIP

E. coli 连接酶 相关产品： 名称 Cat # 大小 浓度 价格 E.coli ligase EDLA-100 1,000 units 4,000 U/ml ￥850.00 E.coli ligase EDLA-200 4,000 units 4,000 U/ml ￥2550.00 E.coli ligase EDLA-OEM Any Size 询价 10x E. coli Ligase Reaction Buffer B-ED10 50ml ￥310.00 条件：-20℃保存 制品说明： + E. coli 连接酶是一种催化双链 的5’-磷酸和3’-羟基形成磷酸二酯键的NAD 依赖性连接酶。该酶易催化双链 粘性末端的 ® 连接，也可作用于有缺口的 末端。在高浓度PEG或Ficoll 等试剂作用下，也可连接 的平滑末端。随酶提供10X反应缓冲液。 用途： • 克隆的连接，引物延伸 • Okayama和 Ber NA 来源： 含有E. coli 连接酶过表达克隆的E. coli菌株。 浓度（比活）： 6000 U/mg 单位定义： 1单位E. coli 连接酶是指在16℃，标准实验条件下，30内分钟能使至少50%的经HindIII消化的λ 片段 [5’端浓度为 0.12 μM ，300 μg/ml] 连接所需的酶量。 反应条件： 1X E. coli 连接反应缓冲液 16℃孵育 10X E. coli 连接反应缓冲液： 30 mM Tris-HCl ，4 mM MgCl 2 ，26 μM NAD ，1 mM DTT ，50 μg/ml BSA ，25°C 环境下，pH为 8.0。 操作步骤： 1. 离心管中加入下列试剂并混匀； 试剂 试剂量 5 μg 10X E. coli 连接反应缓冲液 2 μl E. coli 连接酶 2.5 μl （10U） ddH2O 加至终体积为 20 μl