医学免疫学教学课件：22-免疫学检测技术的基本原理.pptVIP

（二）淋巴细胞及其亚群的分离 1、磁珠分离法 先将特异性抗体（如抗CD4）吸附磁性微珠上 2.荧光激活细胞分离仪分离法 又称为流式细胞术（Flow cytometry , FCM） 将光学流体力学、电子学和计算机等多种技术综合为一体， 对单个细胞进行快速、灵敏、多参数的定量测定，并进行综合分析的一项技术。 需要流式细胞仪 （二）淋巴细胞及其亚群的分离 流式细胞仪主要原理 将细胞悬液与标有荧光素的单克隆抗体反应。细胞经喷嘴流出，每一微滴只含一个细胞。微滴经过检测器时，检测器根据激光束的散射，判断每滴是否含有细胞。借助光电效应，微滴通过电场时，可出现不同偏向。利用不同的荧光素标记的单克隆抗体染色，能同时分析细胞表面 的2～3种表面标志，因此可以收集所需类型的细胞，并以数字显示细胞数量。 （二）淋巴细胞及其亚群的分离 3.抗原肽-MHC分子四聚体技术 二、免疫细胞的功能测定 1.T细胞功能测定 2.B细胞功能测定 3.细胞毒试验 4.吞噬功能测定 5.细胞因子的检测 1.T细胞功能测定 迟发型超敏反应的检测：皮试 T细胞增殖试验 形态学方法：淋巴母细胞计数 3H—胸腺嘧啶核苷 掺入法 MTT检测法： 线粒体脱氢酶 四甲基偶氮唑蓝 紫褐色甲潜颗粒（被异丙醇溶解）