多种植物总DNA提取方法及详细步骤.docxVIP

植物总DNA提取 一、常用方法改良CTAB法(改良自精编分子生物学实验指南，原蓝猪耳实验方案，拟采用)材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4°C的黑暗中饥饿1?2d, 一、常用方法改良CTAB法(改良自精编分子生物学实验指南，原蓝猪耳实验方案，拟采用)材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4°C的黑暗中饥饿1?2d,以消耗淀粉和其他多糖。试剂：(1)2-巯基乙醇(2-ME)⑵CTAB抽提液CTAB/NaCl溶液24：1(V/V)氯仿/异戊醇CTAB沉淀液高盐TE缓冲液⑺70%乙醇(8)TE缓冲液操作：(1)称取样品0.2g，去除表面的DNA污染，置于研钵中与液氮共研成细粉。⑵将冻粉转入2ml离心管中，立即加入1000可(980+20)预热至65C的CTAB抽提 植物基因工程，王关林，2002 SDS法(植物基因工程，王关林，2002) 试剂： ⑴2xCTAB提取缓冲液操作： ⑴2ml离心管中加入1ml提取缓冲液，65C预热。 取0.2g新鲜幼嫩叶片，于液氮中迅速研磨成粉。 将呈干粉状态的研磨物迅速转入提取缓冲液中，尽快混材料预处理：从野外采集的新鲜叶片若比较衰老，运回后可放在4C的黑暗中饥饿1?2d，以消耗淀粉和其他多糖。 试剂： 提取缓冲液：100mmol/LTris-Cl(pH8.0)、50mmol/LEDTA(pH8.0)、500mmol