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专题十七 基因工程与细胞工程
1.基因工程又称基因拼接技术和DNA 重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生
物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图,回答下列问题:
(1)通过 PCR 技术进行目的基因扩增时,要有一段已知目的基因的核苷酸序列为前提,其
作用是________。
(2)人工合成的目的基因必须拼接____________后才可能在宿主细胞中得以表达。进行①
过程时,需要的基本工具是____________________________________________________。
(3)图中已转化的宿主细胞指的是________________________________。若图中宿主细胞
为动物细胞,②过程在操作时需采用______________(填仪器名称)进行显微注射;若图中宿
主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是
________________________________________________________________________。
(4)艾弗里等人的工作是基因工程的先导,艾弗里等人通过不同类型肺炎双球菌的转化实
验证明了___________________________________________________________________
_______________________________________________________________(答出两点)。
解析:(1)通过 PCR 技术进行目的基因扩增时,耐高温的DNA 聚合酶只能从引物的末端连
接单个脱氧核苷酸,故需要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物。 (2)目的基因是
编码蛋白质的序列或调控因子,不包含非编码序列的转录调控因子,故人工合成的目的基因
必须拼接启动子、终止子后,才可能在宿主细胞中得以表达。①过程为基因表达载体的构建,
需要将切割好的目的基因和质粒连接,故进行①过程时,需要的基本工具是 DNA 连接酶。(3)
图中已转化的宿主细胞指的是已导入 目的基因并且 目的基因能稳定遗传和表达的细胞。若图
中宿主细胞为动物细胞,常用显微注射法将 目的基因导入动物细胞,故②过程在操作时需采
用显微注射仪进行显微注射;若图中受体细胞是大肠杆菌 (微生物),由于未处理的大肠杆菌
吸收质粒(外源 DNA)的能力弱,则需要用钙离子处理大肠杆菌,使之成为感受态细胞。(4)艾
弗里等人的工作是基因工程的先导,艾弗里等人通过肺炎双球菌转化实验,该实验中 S 型肺
炎双球菌的 DNA 能使 R 型活菌转化为 S 型活菌,说明 S 型肺炎双球菌的 DNA 能进入 R 型活菌,
并使其发生稳定性转化,证明了生物的遗传物质是 DNA,DNA 可以从一种生物个体转移到另一
种生物个体。
答案:(1)合成引物 (2)启动子、终止子 DNA 连接酶 (3)已导入目的基因并且目的基
因能稳定遗传和表达的细胞 显微注射仪 未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA)的能力弱
(4)生物的遗传物质是 DNA,DNA 可以从一种生物个体转移到另一种生物个体
- 1 -
2.CRISPR/Cas 9 系统基因编辑是一种对靶向基因进行特定 DNA 修饰的技术,其原理是由
一个向导 RNA(sgRNA)分子引导 Cas 9 蛋白到一个特定的基因位点进行切割。受此机制启发,
科学家们通过设计 sgRNA 中碱基的识别序列,即可人为选择 DNA 上的任一目标位点进行切割
(如图)。
(1)从 CRISPR/Cas9 系统作用示意图看,能够行使特异性识别 DNA 序列并切割特定位点功
能的分子是______________,其类似于基因工程中的____________的作用。
(2)CCR5 基因是人体的正常基因,其编码的细胞膜通道蛋白 CCR5 是 HIV 入侵 T 淋巴细胞
的主要辅助受体之一。科研人员依据______________的部分序列设计 sgRNA 序列,导入骨髓
______________细胞中,构建 sgRNA-Cas9 复合体,以实现对 CCR5 基因的定向切割,变异的
CCR5 蛋白无法装配到细胞膜上,即可
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