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实验八 紫外可见分光光度法定性、定量分析苯酚 一、目的要求 了解 UV—3150 型紫外可见分光光度法的构造、性能及使用方法。 学会分析光度法制作标准曲线的方法。 掌握紫外可见分光光度法测定物质含量的实验技术。二、基本原理 1.紫外—可见近红外分光光度计的构造及原理 紫外—可见分光光度计由电源、单色器、吸收池、检测器以及数据处理及记录系统（计算机）等组成。 （1）光源 光源的作用是提供激发能，使待测分子产生吸收。要求能够提供足够强的连续光谱、有良好的稳定性、较长的使用寿命，且辐射能量随波长无明显变化。常用的光源有热辐射光源和气体放电光源。 (2) 单色器 单色器的作用是使用光源发出的光变成所需要的单色光。通常由入射狭缝、准直镜、色散元件、物镜和出射狭缝构成。 吸收池 用于盛放试液。石英池用于紫外可见区的测量，玻璃池只用于可见区。 检测器 简易分光光度计使用光电池或光电管作为检测器。最常见的检测器是光电倍增管。光电倍增管的特点是在紫外—可见区的灵敏度高，响应快。2.分光光度法的分析原理 紫外可见分光光度法，即紫外—可见吸收光谱法，它是研究分子吸收紫外— 可见波长范围内的吸收范围。分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。可以使用标准光谱再结合其他手段进行定性分析。 分光光度计是利用物质分子对某一特定波长光有强吸收，其吸收程度与溶液中物质浓度有定量关系，根据朗伯比尔定律：A=εbc，可以对溶液进行定量分析。三、实验内容与方法 （1）仪器与试剂 UV—3150 型紫外可见分光光度计；容量瓶，比色管，移液管，苯酚样品 （2）操作步骤 ①打开仪器以及计算机，进入软件操作程序，待仪器自检结束，进行操作。 ②设定光谱测定条件，进行测定。 ③测定结束，关闭仪器并整理实验器材。四、数据分析 浓度（ppm） 0 10 20 30 40 60 Abs 0 0.168 0.322 0.486 0.66 1.008 Y = -0.00589 + 0.01675 * X1.0 Y = -0.00589 + 0.01675 * X 1.0 R =0.99948 2 0.8 0.6 sbA 0.4 0.2  浓度0 10 20 30 浓度 ppm  40 50 60 由图中标准方程可得，待测样品的平均吸光度为，从而得到，待测样品的浓度为 20.650ppm. 2701.6 270 1.4 1.2 sbA 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 200 250 300 350 400 Wavelength/nm 紫外可见分光光度计谱图