T3对无血清培养成年鼠心肌细胞的保护作用及Fas系统相关机制研究的中期报告.docxVIP

T3对无血清培养成年鼠心肌细胞的保护作用及Fas系统相关机制研究的中期报告 本研究旨在探究T3对无血清培养成年鼠心肌细胞的保护作用及其与Fas系统相关机制的关系。 研究方法： 1. 分离、培养成年鼠心肌细胞 采用无酶消化-胶原酶消化法从雄性SD大鼠心脏中分离出心肌细胞，培养在DMEM培养基中，添加50%人工血清替代物、1%青霉素/链霉素及100 μmol/L 5-氟-2-脱氧尿苷（FUDR），将细胞维持在37℃下的5% CO2培养箱中。 2. T3处理 将细胞分为4组：对照组、T3（10 nM）组、CHX（5 μmol/L）组、T3+CHX组。对照组和CHX组均添加相同体积的培养基作为对照处理，T3组和T3+CHX组分别添加10 nM T3，T3+CHX组在添加T3 30 min后再添加5 μmol/L CHX处理。 3. 测定细胞存活率 将细胞用Trypan Blue染色后，使用自动细胞计数仪检测存活率。 4. 检测Fas相关因子表达 采用RT-PCR和Western blot检测细胞中Fas、FasL、caspase-3和Bcl-2等相关基因和蛋白的表达水平。 中期结论： 初步实验结果表明，在无血清培养条件下，T3处理能够提高成年鼠心肌细胞的存活率，并且抑制Fas系统相关基因和蛋白的表达。这表明T3可能通过调节Fas系统的激活抑制心肌细胞凋亡，从而保护心肌细胞。接下来，我们将继续深入探究T3的保护机制及其作用靶点，为心血管疾病的治疗提供新的理论支持。