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高压氧联合α--硫辛酸对高糖培养下视网膜神经节细胞的保护作用的中期报告
本研究旨在探究高压氧联合α-硫辛酸对高糖培养下视网膜神经节细胞的保护作用,并分析其机制。目前已完成实验的中期报告如下:
实验方法:
选用SD大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)为研究对象,分为4组,即正常培养组、高糖培养组、高糖+高压氧处理组和高糖+高压氧+α--硫辛酸处理组。其中高糖培养组、高糖+高压氧处理组和高糖+高压氧+α--硫辛酸处理组均饲养于含50mM葡萄糖的DMEM培养基中,正常培养组饲养于含5mM葡萄糖的DMEM培养基中。高压氧处理组和高糖+高压氧+α--硫辛酸处理组在高糖培养的基础上,利用高压氧舱进行高压氧处理,压力为3ATA,时间为60分钟。在处理后的24小时,采用MTT法检测细胞存活率和LDH法检测细胞死亡率。同时,应用RT-qPCR技术检测RGCs中运输素受体(TfR)、神经元生长因子受体(NGFR)和炎性因子(IL-6和TNF-α)的表达水平,Western blot技术检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达水平。
实验结果:
1. MTT检测结果显示,高糖培养使RGCs存活率显著降低,而高压氧联合α--硫辛酸处理可明显提高RGCs存活率,减少细胞死亡率。
2. RT-qPCR检测结果显示,高糖培养可导致TfR和NGFR的表达水平下降,而高压氧联合α--硫辛酸处理可明显提高两者的表达水平;高糖培养可诱导炎性因子IL-6和TNF-α的表达水平增加,而高压氧联合α--硫辛酸处理可明显降低两者的表达水平。
3. Western blot检测结果显示,高糖培养可诱导Bax的表达水平升高,Bcl-2的表达水平降低,而高压氧联合α--硫辛酸处理可逆转这种情况。
综上所述,当前实验结果表明,高压氧联合α--硫辛酸能够降低高糖培养对RGCs的损伤作用,其机制可能与提升RGCs的存活水平、抑制炎性反应和调节凋亡相关蛋白有关。
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