基于猪δ冠状病毒 n蛋白抗原表位区aa221342间接elisa方法的建立.docxVIP

基于猪δ冠状病毒 N蛋白抗原表位区(aa221-342)间接ELISA方法的建立 　　摘 要：猪δ冠状病毒(Porcine deltaconoravirus，PDCoV)是一种新型猪冠状病毒，PDCoV常与其他猪源冠状病毒发生混合感染，临床上难以区分。为了建立一种检测该病原抗体的间接 ELISA 检测方法，本研究利用实验室成功截短表达并纯化的PDCoV N蛋白（221-342aa）为包被抗原，最终确定抗原包被浓度为1.0μg/100μl，包被条件为4℃ 12 h，血清稀释度为1：50，封闭液为5%脱脂牛奶，一抗工作条件为37℃ 60min，二抗稀释倍数为1：5000，二抗孵育时间为30mi