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影响酶活性的因素 主讲人:王美涵 张天祎 设计人:209宿舍 为什么要研究影响酶活性的因素? 同一反应,酶催化反应的速度要比一般催化剂催化的反应速度要大106~1013倍。 大多数酶是蛋白质,对环境条件极为敏感。在高温、强碱或强酸、重金属等影响蛋白质变性的条件下,都会使酶丧失活性。 一、实验目的 1.进一步学习酶的概念,了解酶的本质,特性和作用。 2.通过实验探究,使学生了解影响酶活性的因素。 3.探究各因素对酶的活性的影响。 二、实验原理 酶的活性受温度和pH等条件的影响,适宜的温度和pH有利于酶发挥活性。 温度对酶的影响是: pH值对酶的影响是: 三、实验材料及用具 试剂: 体积分数30%过氧化氢溶液 质量分数2%的新配制的淀粉酶溶液 质量分数3%的可溶性淀粉溶液 质量分数5%HCl溶液 质量分数5%NaOH溶液 新鲜的质量分数为20%的肝脏研磨液 蒸馏水 冰块 碘液 器材: 试管、试管架、试管夹、量筒 、滴管、PH试纸、水浴锅 小烧杯、废液缸 温度计 1.取6支试管分别编号为:A、A’、B、B’、C、C’。 2.在A、B、C中分别加入2ML淀粉溶液。在A’、B’、C’中分别加入1ML淀粉酶溶液。然后将A、A’放在60℃水浴中, B、B’放在0 ℃冰水中, C、C’放在100 ℃水浴中。保持温度5分钟。 3.同时将三个酶溶液倒入相应水浴中的淀粉溶液中摇匀,保持相应的水浴温度。 4.一段时间后,在A、B、C中分别加入1滴碘液,摇匀,观察试管中的颜色变化。 四、实验步骤 (一)、探究温度对淀粉酶活性的影响 试管 A B C 淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 温度 60℃温水 0 ℃ 100 ℃ 淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 碘液 1滴 1滴 1滴 结果现象 (一)、探究温度对淀粉酶活性的影响 1.取3支试管分别编号为:A、B、C。分别加1ML过氧化氢酶溶液。 2. A中加入2ML蒸馏水。 B、C中分别加入等量氢氧化钠溶液和盐酸溶液。摇匀。 3.在三支试管中分别同时加入1ML过氧化氢溶液。 4.一段时间后,观察试管中是否有气泡冒出和气泡的多少。 (二)、实验:探究pH对过氧化氢酶活性的影响 序号 项 目 试管 A B C 1 注入新鲜的肝脏研磨液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸馏水 2mL / / 3 注入氢氧化钠溶液 / 2mL / 4 注入盐酸 / / 2mL 5 注入过氧化氢溶液 1mL 1mL 1mL 6 结果现象 (二)、实验:探究pH对过氧化氢酶活性的影响 注意事项 1.一定要控制单一变量 2.加入试剂的先后顺序不要颠倒,严格按照实验步骤进行 3.一定要严格控制温度、PH等条件 4.加碘液时一定要待试管冷却后再加 5.实验器材使用前后都要清洗干净,以便下一次使用 五、实验现象 试管 A B C 淀粉溶液 2mL 2mL 2mL 温度 60℃温水 0 ℃ 100 ℃ 淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 碘液 1滴 1滴 1滴 结果现象 不变蓝 变蓝 变蓝 探究温度对淀粉酶活性的影响实验现象 1. 0℃时未变蓝,是因为取出试管后在室温下放置了一段时间,使溶液渐渐恢复到了室温,酶的活性也渐渐恢复,淀粉被分解,故加碘后溶液未变蓝。 2. 60 ℃条件下变“蓝”,可能是因为碘液的颜色与淀粉酶溶液的颜色相互作用的结果,事实上这种蓝与0℃和100 ℃时所呈现的蓝并不一样,并不是淀粉未被水解的结果。 3. 100 ℃条件下未变蓝,可能是因为我们没有使水浴锅保持100 ℃,而是在达到100 ℃后停止了加热,这样水浴温度慢慢降低,酶没有完全失活,淀粉被分解,加碘后也就无蓝色出现。 pH对过氧化氢酶活性的影响的实验现象 序号 项 目 试管 A B C 1 注入新鲜的肝脏研磨液 1mL 1mL 1mL 2 注入蒸馏水 2mL / / 3 注入氢氧化钠溶液 / 2mL / 4 注入盐酸 / / 2mL 5 注入过氧化氢溶液 1mL 1mL 1mL 6 结果现象 产生大量气泡 无气泡产生 无气泡产生 六、结果分析 4. 加盐酸、氢氧化钠处理的也有少量气泡产生,可能是因为过氧化氢酶浓度太高,Hcl、 NaOH的量不足以使全部酶失活;或者是Hcl、 NaOH本身的浓度过低不能使酶完全失活;还可能是加入Hcl、 NaOH后处理时间过短,未来得及使酶失活。 实验中出现的结果及分析 实际实验结果情况:(1)在100或60摄氏度中变蓝 (2)试管中的颜色偏紫色 实际实验结果分析:(1)冰水中的实验最不易做成,因为学生加的酶过量或保温时间不够等。 (2)放置的时间不够 (3)在放置时弄混试管 (4) 你的困惑 1. 在探究温度和pH对酶活性的影响实
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