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第三章 植物组织与器官培养 第一节 植物组织培养 植物组织培养（组培 plant tissue culture） 指将植物组织在适当培养条件下诱导长成完整植株的技术 试管植物（Vitro plant） 植物组织培养再生的植物 细胞全能性（totipotency）---植物组织培养技术的重要理论基础--- 在适宜的条件下，一个来自已分化的根、茎、叶等组织的细胞，经过离体培养可以发育成同其亲本一样的完整植株。 分化程度越高，全能性越低 植物脱毒(virus elimination) 利用植物组织培养技术,脱除植物细胞中侵染的病毒,生产健康的繁殖材料的技术. 快(速)繁(殖) 利用细胞的再生特性,在组织培养条件下加速繁殖材料的个体生产,提高繁殖系数的技术 重点与难点： 1.植物组培再生植株的发生途径 2.植物组培的基本过程 一.植物组培发展历史： 1934—1948 植物生长素被发现 1956 激动素 1958 Steward 从胡萝卜根愈伤组织获得单细胞，诱导成胚再生成植株。 20C 60s 植物组培规模化应用 “兰花工业” 种子萌发时先是胚的膨大,种皮破裂,40天时肉眼可见浅黄色的原胚呈球状,称为原球茎 1960年法国的Morel观察到虎头兰的茎尖在无菌的培养基上能够形成扁圆形的小球体，这些小球体与幼胚发育成的原球体非常相似，故称为原球茎. 在一定条件下，这些原球茎通过切割能够快速增殖，并能够再生成完整植株---兰花试管苗“工业”，简称“兰花工业”。 二.植物组培再生植株的发生途径 两条： 器官发生途径 体细胞胚发生途径 1.器官发生途径 1.1基本概念 1）器官发生 指离题培养的组织或细胞团分化形成不定根、不定芽等器官的过程 不定根（adventitious root）指植物的茎或叶上所发生的根。它不是直接或间接由胚根所形成的，没有固定的生长部位，它不按正常时序发生。有扩大植物吸收面积和增强固着或支持植物的功能 。 不定芽 在高等植物正常的个体发育中，芽一般是只从茎尖或叶腋等的一定位置生出。所以这种象顶芽、腋芽、副芽等均在一定部位生出的芽，称为定芽．与此相反，凡从叶、根、或茎节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽，则统称为不定芽。 2）.愈伤组织（Callus） 脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散细胞团 3）.外植体（explant） 植物体上切取下来进行培养的部分组织或器官 魔芋的愈伤组织 菠萝的愈伤组织 草莓的愈伤组织 1.2 器官发生步骤 1）. 启动期 诱导外植体细胞脱分化和分裂 2）.愈伤组织诱导 诱导脱分化细胞形成愈伤组织 3）.拟分生组织的形成（ meristemoid ） 　在植物组织培养中，不是所有的培养细胞都同样分裂增殖，常常是细胞群中的一部分细胞进行旺盛的分裂形成细胞块，此称为拟分生组织。这里指的是只具有分生能力的细胞 。 4）.器官原基和器官的形成 器官原基：胚胎发育中能辨认出的将来发育为某器官的部分。 器官发生：先芽后根、先根后芽、根芽同生 2.1体细胞胚胎发生的方式 植物组织培养过程中植物体细胞胚胎途径可归纳为两类：直接途径和间接途径。 直接途径是直接从原外植体不经愈伤组织阶段发育而成 间接方式是体胚从愈伤组织或悬浮细胞（包括原生质体）、有时也从已形成的体胚的一组细胞中发育而成，如香雪兰（Freesia refracta）花序外植体经直接体细胞胚胎发生途径形成再生植株。 三.植物组织培养的基本过程 1).培养材料的选择与采集 2).培养材料的预处理 3).制备外植体 [诱导愈伤组织 悬浮培养 诱导胚性组织] 4).接种和培养 5).根的诱导 6).炼苗移栽 1 外植体的选择 基本要求：生长正常、无病虫害. 从中选择适宜的组织器官。 外植体的选择因获得植物细胞的处理方法而异. 1）.直接分离 选择细胞之间粘连程度较小的植物组织/器官 最好：叶片 2）.愈伤组织的诱导 不同植物种类及同一植物的不同器官对于诱导条件的反应是不同的。 （1）.种类 百合科 风信子 较易诱导和再生小植株 而同属百合科的郁金香 则较困难 （2）.基因型 百合花（100多种:亚洲百合、麝香百合、香水百合、火百合、姬百合等 ），以花药为外植体时，亚洲杂交种系的诱导率大于麝香杂种系 亚洲百合 麝香百合 （3）.取材部位