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- 2023-10-15 发布于四川
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专题十五 生物技术实践
关键知识点填空
实验一:大肠杆菌的培养和分离
细菌以 二分裂 繁殖。用革兰氏染色法将细菌分为革兰氏 阳 性和革兰氏 阴 性的细菌,大肠杆菌是 阴 (上述种类的哪一种)、 兼气型 (呼吸作用类型)的肠道细菌。
培养基为生物生长提供营养,培养细菌常用 LB 培养基,按照物理性质分为 LB固体 培养基
和 LB液体 培养基,前者主要用于 分离、筛选 ,后者主要用于 扩大培养 。区别是是否添加 琼脂 。灭菌之 前 调节pH。
在培养微生物时,必须进行 无菌 操作,首要条件是各种器皿必须无菌,各种培养基也必须是无菌的,目前一般的灭菌方法为 高压蒸汽灭菌 法, 121 ℃, 15 min,高压蒸汽灭菌锅压力必须降为0时才能打开,因为培养基会因为锅内 压力过大 而喷出来。灭菌锅加热后,需要等到水蒸气把锅内原有的空气赶走后,才关闭气阀,此后气压和温度持续上升到指定数值后才开始计时。如果水蒸气没有把空气完全赶走,会导致压力达到达标值后,温度没有达到目标值。另外水蒸气的热穿透力强,有利于杀死芽孢和孢子。倒平板、接种、平板涂布、平板划线都要在 酒精灯火焰 旁进行操作。为了使细菌繁殖更快,一般在 摇床 中进行振荡恒温培养,
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