抗肿瘤药物筛选及临床实验.docVIP

?抗肿瘤药物筛选及临床实验 责任编辑:luanchaojibing,作者：佚名 文章来源：本站原创 点击数： 更新时间：2005-10-24 14:54:02 ?(—)抗肿瘤药物的筛选 ??? 1．体内筛选方法体内筛选方法是药物应用于有移植性肿瘤的动物进行实验的方法。肿瘤模型是进行药物筛选的先决条件。一个理想的用于药物筛选的肿瘤模型应具备的条件是：①对临床疗效有预告性；②快速、经济；③指标明确、客观；④重现性好，结果可信赖。常用于鼠类，近年来在体内试验方面，裸鼠被广泛应用于抗肿瘤药物的筛选，目前已成功地将官颈癌、卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌等10余种人体肿瘤移植于裸鼠，国内已成功地建立了卵巢癌裸鼠皮下移植瘤和腹水瘤模型，并已用于科研和临床。 ??? 在体内试验方面需注意：①给药途径。因腹腔给药假阳性较多见，因此要筛选一种药物是否对一种移植肿瘤确实有效，需应用两种以上不同的给药途径，并且三次实验结果均显示标准抗癌活性时才能判定有效。②在每一种给药途径中，还需观察不同剂量的抗肿瘤活性，以揭示有效抗肿瘤药物的量效关系。 ??? 2．体外筛选方法? 因体内筛选需要的技术条件高，故大批筛选或粗选时多采用体外筛选。 ??? (1)人肿瘤集落形成法：该方法是将单细胞悬液，接种到含软琼脂的培养基中，培养一定时间后一部分肿瘤细胞能够在琼脂中生长，形成集落。?通过药物处理组和对照组的细胞集落生成数量比较，可作为肿瘤化疗的药物敏感试验。每次可用多个平面筛选8一10种药物，以找出对肿瘤细胞最敏感的药物。此法快速、经济、选择性高，而且结果可靠，故在临床用药选择和抗肿瘤药物开发上将得到广泛应用。该方法缺点是活肿瘤组织单细胞悬液的制备比较困难，并且集落形成的成功率不够高，故在方法学上需待完善。 ??? ALberts等以此法指导69例复发转移卵巢癌的治疗，结果临床有效率为54％；经验治疗组的有效率为20％；而以。HCTA中抗药的药物治疗的有效率为8％。 ??? (2)三磷酸腺苷生物发光法(ATP法)：其基本原理是ATP为细胞内能量的基本来源，其浓度与活细胞量有关。细胞死后ATP的产生立即终止。利用荧光素．荧光素酶试剂定量测定细胞内ATP，其水平与活细胞数呈线性关系。检测许多抗癌药物的体外结果显示，ATP水平与药物对细胞的毒性作用之间有很好的相关性。 ??? Sevin等对22例卵巢癌的研究表明，ATP法的药物体外敏感性与体内疗效之间有效符合率为’100％，而体外抗药及体内无效率为66．7％，其中11例体外高度敏感病例，临床8例获CR，3例获PR，6例体外中度敏感病人临床均获PR。Andreotti等以多点浓度分析顺铂的体外敏感性与卵巢癌临床化疗效果关系，结果ATP法的准确率达90％以上。? ? ATP生物发光法所检测对象为所有活细胞，包括终末期及静止期细胞，这一点优于放射性同位素前体掺入试验，并具有操作简便，出结果快等优点。但此方法指导临床的报道较少，其可靠性有待进一步观察。 ??? (3)M1Tr药敏试验：基本原理：细胞中毒过程中，线粒体呼吸链上的琥珀酸脱氢酶能脱下琥珀酸的氢原子，使之氧化成延胡索酸，而染料3一(4，5)-双甲基-2．噻唑-(2，5)-二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)作为脱下氢原子的接受剂，被还原成蓝紫色，通过分光光度计检测颜色的深浅变化，就能定量地反映细胞数和(或)活性的变化。具有代谢活性的细胞，不管是处于静止期，还是分裂期，都有还原MTT的作用。 ??? MTT法在指导肿瘤临床的预见性化疗上已取得可喜的效果。1991年Yamaue等根据药敏结果指导31例不同肿瘤病人的治疗，结果有效率为32．3％(10／31)。Sargent等用MTI、法指导21例白血病人的治疗，结果体外敏感的12例中，有10例体内治疗有效，9例体外试验耐药者，体内治疗均为耐药。 ??? 上述方法各有不同的优缺点，MTY法具备了简便、快速、与临床疗效相关性好的要求，但结果易受非肿瘤细胞的影响。由于恶性肿瘤的异质性和试验技术上的复杂性，目前的资料尚难确定何种方法对指导临床治疗有更好的作用，相信随着肿瘤细胞生物学和生物化学研究的深入，许多方法不断得到改进，将会在指导临床肿瘤化疗中发挥确切的作用。 ??? (二)抗肿瘤药物的临床试验临床试验规范(good clinical trim practice，GCF’)是以临床试验的设计、实施、总结和报告的一种规范，以便向公众保证资料的完整、可靠，保护病人的权利。目前已有美、法、德、日、意、瑞士、奥地利、加拿大等13个国家将GCP列为法律。我国已在大力推广药物生产质量管理规范(GMP)，对临床试验规范也十分重视。 ??? GCP与既往临床研究不同之处一是强调伦理方面，开展临床试用前一定要向病人说明试用的目的及药物可能的疗效和不良反应并