牙膏中丙烯酰胺的测定 高效液相色谱串联质谱法.pdfVIP

牙膏中丙烯酰胺的测定 高效液相色谱串联质谱法 警示——使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。 1 范围 本文件描述了牙膏中丙烯酰胺的高效液相色谱串联质谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、 试验步骤、结果计算、回收率和精密度、允许差等内容。 本文件适用于牙膏中丙烯酰胺的测定。 本文件中丙烯酰胺的检出限为0.01 mg/kg ，定量限为0.03 mg/kg 。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 牙膏中丙烯酰胺经水提取、正己烷净化后，采用高效液相色谱串联质谱仪多反应监测模式检测，以 保留时间和特征碎片离子丰度比定性，内标法定量。 5 试剂和材料 除另有说明外，所用试剂均为色谱纯。 5.1 水：GB/T 6682 ，一级。 5.2 乙腈。 5.3 正己烷。 5.4 甲酸。 5.5 0.1% 甲酸溶液 （体积分数）：取1 mL 甲酸 （5.4 ），用水稀释至1 L，混合均匀。 5.6 标准品：丙烯酰胺标准品的英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量和化学结构式见附录A 表 A.1 ，纯度不小于98% 。 13 5.7 同位素内标： C -丙烯酰胺的英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量和化学结构式见附录A 表 3 A.1 ，纯度不小于98% 。 2 5.8 标准储备液：准确称取丙烯酰胺标准品 （5.6 ）10 mg （精确至0.0001 g ）于10 mL 容量瓶中，用乙 腈 （5.2 ）溶解并稀释至刻度，即得质量浓度为1000 µg/mL 的标准储备液。于2 ℃ ~ 8 ℃避光保存，可 保存12 个月。 5.9 标准中间液：准确移取0.1 mL 标准储备液 （5.8 ）于50 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，即得质量 浓度为2.0 µg/mL 的标准中间液。于2 ℃ ~ 8 ℃避光保存。 13 5.10 内标储备液：准确称取 C -丙烯酰胺内标5 mg （5.7 ）于10 mL 容量瓶中，用乙腈（5.2）溶解并 3 稀释至刻度，即得质量浓度为500 µg/mL 的内标储备液。于2 ℃ ~ 8 ℃避光保存，可保存 12 个月。 5.11 内标工作液：准确移取0.1 mL 内标储备液 （5.10 ）于50 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，即得质 量浓度为1.0 µg/mL 的内标工作液。于2 ℃ ~ 8 ℃避光保存。 5.12 滤膜：孔径0.22 µm，材质为尼龙66。 6 仪器设备 6.1 高效液相色谱串联三重四极杆质谱仪：配电喷雾离子源（ESI ）。 6.2 电子天平：感量0.001 g 和0.000 1 g。 6.3 漩涡振荡器。 6.4 超声波清洗仪：工作频率不低于40 kHz 。 6.5 离心机：最高转速不低于4 000 r/min 。 7 试验步骤 7.1 试样处理 称取1 g （精确至0.00 1 g）试样，置于50 mL 具塞离心管中，准确加入0.2 mL 内标工作溶液（5.11）， 涡旋混合均匀。准确加入10 mL 水，具塞后涡旋混合混匀，超声5 min 。然后加入5 mL 正己烷（5.3 ）， 涡旋1 min，于4 000 r/min 离心5 min 。取下层水溶液，经微孔滤膜（5.12 ）过滤后待测。 7.2 测定 7.2.1 高效液相色谱参考条件 高效液相色谱测定参考条件如下： a) 色谱柱规格：C18色谱柱，1.8 μm，100 mm ×2.1 mm ，或性能相当者； b) 流动相：乙腈 （5.2 ）和0.1% 甲酸