《基础医学实验课件：医用显微镜基本操作》.pptVIP

* * * * 基础医学实验课件：医用显微镜基本操作 本课程将详细讲解医用显微镜的基本操作，包括如何选择镜头、打开光源、调焦、放大倍数等。 什么是医用显微镜？ 定义 医用显微镜（medical microscope）是一种专门用于组织切片、病理变异和细胞学等观察的光学仪器。 应用 主要应用于医学、生物学、药学等领域，用于进行肿瘤、炎症、血液、组织等方面的细胞和组织形态学观察。 医用显微镜的分类 光学显微镜 是一种利用透镜等光学元件产生放大像的显微镜，适用于低倍率放大。 电子显微镜 利用电子束以及电子光学元件来选择性传输和放大电子图像的富含理论和技术的仪器。 立体显微镜 又称物镜显微镜或放大型显微镜，一般用于从事昆虫标本尤其是翅片伦理和植物标本等的分类和观察。 医用显微镜的结构 目镜 位于显微镜的顶部，用于放大物镜中的图像。 物镜 位于载物台底部，用于对待观察物放大。 聚光镜 聚集光线并将其聚焦到物镜上。 载物台 用于放置待观察的物体或载玻片。 镜头的选择及更换 选择镜头 要根据样品、实验目的和所需放大倍数来选择合适的显微镜镜头。 更换镜头 更换镜头时需要注意，应该先将现有的镜头卸下，然后将要更换的镜头插入。 光源的打开和调节 1 打开光源 通常使用手柄开关开启显微镜上的灯。 2 调节光源 通过移动光源调节焦距，以获得适当的照明亮度。 目镜与物镜的调节 1 校正目镜与物镜 在目镜与物镜使用前，需要进行校正步骤，以确保图像清晰。 2 聚焦目镜与物镜 通过调节聚光镜和目镜可以调整观测成像的清晰度，保证看到的图像清晰细致。 调焦与确定焦距 调焦方法 旋转放大调节器 移动载物台 确定焦距 通过眼睛观察找到下沉到最底部的位置 然后逐渐旋转调焦装置，直到将样品完全对焦。 物镜的放大倍数 1 常见放大倍数 常用物镜倍率有4x、10x、40x等，不同的物镜适合不同的细胞学、组织学工作。 2 累倍原理 累倍原理可以让不同的物镜进行相乘从而得到较大的放大倍数，例如：4倍物镜×40倍物镜=160倍放大。 怎样观察组织切片 步骤 将组织切片放在载玻片上并添加药剂。 将载玻片放在微镜上并调整好视野。 通过调整聚光镜和目镜让组织切片清晰可见。 提示 观察组织切片时建议缓慢调整显微镜，以免样品移动或刮损载玻片。 片源的准备及处理 片源准备 处理要进行快速冷冻等方法。 截取的样本要尽可能地薄。 片源处理 可采用光学显微镜、电子显微镜等不同手段进行处理。 通常用碘酒进行染色。 观察切片前的准备工作 清洁载玻片 使用特制的纤维布或者细软的毛刷进行清扫，以免留下灰尘影响观察效果。 清洁物镜 物镜是整个显微镜中最易受到污染的部位，清理时需要特别细心和轻柔，使用纯棉布进行擦拭。 有机载玻片的选择 在选择有机载玻片时需要注意质地、厚薄程度及长度等，也可以根据实际需求和预算控制在合理的范围内。 片源与载玻片绑合 1 步骤 将切片与载玻片逐渐接触，让其自然粘合。 用力压平样品与载玻片间的气泡。 2 注意事项 在绑合间断或错位时，可以使用笔尖轻轻压动切片，使其重新定位。 若同时需要染色，染色应在绑合完成之后进行。 切片的染色方法 1 常用染色方法 常用的染色方法有简单染色法、结合染色法和后染色法等，不同染色方法的适用范围和效果略有差异。 2 简单染色法 包括增强对比度的范德沃有氏染色法和红蓝二色染色法等，通常用于肝、肾、心肌等的病理组织学检查。 3 结合染色法 包括两种或以上的颜色，不仅可清晰明了地描绘细胞核数目和形态，还能为纤维组织以及某些分泌细胞的检查提供巨大帮助。 4 后染色法 基于不同组织和细胞分泌出的底物具有与特定染色剂形成复合物的性质，可用于检测多种酶类和分子间的相互作用。 常用的染色剂介绍 苏木精-伊红染色法 常用于病理组织学检查，以强化对比度，染出不同细胞核的形态和构造。 PAS染色法 适用于检测聚糖的杂质和不纯物，特别是血液成份中的糖或蛋白多糖等。 免疫组织化学染色法 主要用于检查组织中的特定分子、蛋白质和抗原等，以揭示各种疾病发生和发展的机制。 如何处理不清晰的显微镜图像 可通过调整聚光镜和目镜的焦距、检查装置中是否插好纯淨无擦伤的镜头、调整光源照射的角度等方法来纠正显微镜图像的模糊、反光等问题。 擦拭医用显微镜的注意事项 显微镜的各个组件表面不能使用粗糙纤维质物或酒精类溶剂进行干擦，建议使用纯棉布或者吸水性好的海绵进行湿擦，以免留下划痕或损坏组件。 关闭医用显微镜后的处理 与开机相比，关闭医用显微镜时要更加小心谨慎。建议先降低调焦装置，然后关闭光源，最后慢慢将物镜向下调。 医用显微镜的维护与保养 1 注意正确使用 按照实验流程进行工作，并避免显微镜的湿度或温度过高或过低。 2 定期清洁 物镜、目镜、镜片等需要定期清洗、护理和贴上保护膜，以延长使用寿命。 *