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Retigeric acid B的抗真菌机制及白色念珠菌中分子工具的构建的中期报告
Retigeric acid B (RAB)是一种从真菌中提取的次级代谢产物,已被证明具有广谱的抗真菌活性。其机制主要包括干扰细胞壁合成和细胞膜功能,导致真菌生长受到抑制。此外,RAB还能够干扰真菌内源性的酵母菌转录激活因子,并抑制真菌的蛋白质合成。
目前,白色念珠菌是临床上最常见的一种真菌感染病原体之一。为了进一步研究RAB的抗真菌机制,我们在白色念珠菌中构建了一个分子工具,通过该工具可以评估RAB对白色念珠菌的抗真菌效果。该分子工具基于CRISPR/Cas9系统,包括两个核酸序列:pCas9-sgRNA和pCAP-pyrG。前者用于引导Cas9基因在白色念珠菌基因组上的特定区域进行切割,而后者则能够恢复由Cas9引起的基因缺失所导致的脱敏状态,从而实现亚细胞水平的基因敲除和还原。
我们已经在实验中使用这个分子工具成功地建立了RAB的抗真菌评估系统。结果表明,该工具能够有效地检测出RAB的抗真菌活性,并显示了其在白色念珠菌中的有效性。这为进一步研究RAB的抗真菌机制提供了基础,并有望为开发新型的抗真菌药物提供理论基础。
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