电子科大细胞生物学第三章细胞生物学研究方法.pptVIP

家蚕细小病毒负染色电镜照片(病毒直径20nm) （陈立华、翟中和） 本文档共76页；当前第30页；编辑于星期三\6点14分 制备过程简单，只需将样品制成悬液，直接滴于载网上，然后用重金属物质染液染色。即可在EM下观察。 重金属物质散射电子的能力较样品本身强，电镜下两者显示出明显的明暗对比，样品呈亮色，而其周围的背景将呈暗色，这样样品表面的微细结构就被衬托出来。 常用染色剂：2％磷钨酸水溶液 本文档共76页；当前第31页；编辑于星期三\6点14分 ? 真空喷镀一般在喷镀仪中进行，将铂、铬、金等重金属在高真空条件下加热，使其蒸发，蒸发出来的金属粒子以一定的角度斜向喷镀于样品表面，这样凸出的样品表面将比周围背景优先包被一层金属薄膜，二者之间的反差加大，样品轮廓清晰地显示出来。 ? 单方向喷镀，样品向着金属发射源一面沉积金属粒子较多，而背侧面较少，形成投影。增强样品反差，样品富立体感。 ? 旋转喷镀，可使样品表面的金属薄膜均匀一致。 3）真空喷镀技术 本文档共76页；当前第32页；编辑于星期三\6点14分 a）快速冷冻 b）低温断裂 c）蚀刻 d）复型 主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构。 4）冰冻蚀刻技术（Freeze etching） 本文档共76页；当前第33页；编辑于星期三\6点14分 样品在低温下迅速冷冻（液氮或液氦中）和低温下，结构“脆弱