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miR-32对大肠癌细胞生物学行为影响及对PTEN调控机制的研究的中期报告
本研究旨在探究microRNA-32(miR-32)对大肠癌细胞生物学行为的影响及其对蛋白酪氨酸磷酸酶(PTEN)调控机制的作用。目前已完成实验室基础实验及初步数据分析。以下是中期报告的主要内容。
实验方法:
1.构建miR-32过表达质粒并转染到人结肠癌细胞株HT29中,同时采用miR-32抑制剂转染到人结肠癌细胞株SW480中。
2.用Real-time PCR及Western blot分别检测PTEN的mRNA和蛋白表达水平的变化。
3.用MTT实验及克隆形成实验检测细胞增殖及侵袭能力的变化。
4.用细胞流式检测细胞凋亡情况。
初步结果:
1. miR-32在结肠癌组织中的表达水平明显高于正常组织。
2. miR-32过表达可以明显促进HT29细胞的增殖、侵袭能力及抑制细胞凋亡;而miR-32抑制可以明显抑制SW480细胞的增殖、侵袭能力及促进细胞凋亡。
3. miR-32可以明显降低PTEN的mRNA及蛋白表达水平;而PTEN在结肠癌组织中的表达水平与miR-32表达呈负相关。
结论:
1. miR-32在大肠癌中高表达,可能与大肠癌恶性行为的增强有关。
2. miR-32对大肠癌细胞生物学行为的影响,可能是通过下调PTEN表达来实现的。
3. 进一步研究miR-32与PTEN调控机制的关系,有望为大肠癌治疗提供新的目标。
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