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我国产意大利蜂蜂毒多肽的分离纯化、结构鉴定、活性测定以及固相合成研究的中期报告
一、产地与材料
本次研究所使用的意大利蜂产地为湖南省昭山县,采集的意大利蜂蜜蜂样本经过初步筛选,其中一种蜜蜂具有较高的释毒能力,被选为本次研究的主要研究对象。
二、蜂毒液的采集及初步分离
意大利蜂蜂毒液采用电刺激的方式进行采集,得到的蜂毒液进行初步分离,得到五个分离组分,其中一组分具有较高的释毒活性,被选为本次研究的主要研究对象。
三、蜂毒多肽的纯化与鉴定
1. DEAE-52阴离子交换层析纯化
初步分离得到的具有释毒活性的组分进行DEAE-52阴离子交换层析纯化,得到了一个主要的吸附峰。采用Sephadex G-75凝胶过滤层析进一步纯化,得到了一个单一的吸附峰。
2. SDS电泳分析
将纯化后的样品进行SDS电泳分析,得到一个分子量约为7kDa的单一条带,说明本次研究所纯化得到的为蜂毒多肽。
3. 质谱(MS)鉴定
使用质谱(MS)对纯化后的样品进行鉴定,得到了一个单一的峰,分子量为7166Da,符合蜂毒多肽的分子量。
四、蜂毒多肽的活性测定
采用动物实验的方式对纯化后的蜂毒多肽进行了毒性测定,结果表明该蜂毒多肽具有明显的释毒作用。
五、蜂毒多肽的固相合成研究
采用固相合成技术合成了蜂毒多肽,并对其活性进行了测试。结果表明合成的蜂毒多肽具有类似于天然蜂毒多肽的释毒作用。
综上,本次研究成功地对意大利蜂产生的蜂毒多肽进行了初步研究,实现了它的分离纯化、结构鉴定、活性测定和固相合成等方面的研究,为后续进一步探索蜂毒多肽的功能机制和应用价值提供了基础研究数据支持。
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