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- 2023-10-27 发布于上海
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水牛BMPR-IB基因cDNA克隆及其RNAi转基因小鼠的制备的中期报告
本研究旨在克隆水牛BMPR-IB基因的cDNA序列,并构建RNAi转基因小鼠模型,以探究该基因在小鼠中的功能。本文是中期报告,介绍了研究进展和结果。
1. 水牛BMPR-IB基因cDNA的克隆
通过PCR扩增,成功克隆了水牛BMPR-IB基因的cDNA序列。经测序和比对,证实该序列与GenBank中的水牛BMPR-IB基因序列一致,长度为2055bp。
2. RNAi转基因小鼠的制备
基于水牛BMPR-IB基因的cDNA序列设计了靶向该基因的siRNA,构建了负载siRNA的表达载体。随后将该载体转染到小鼠胚胎干细胞中,筛选出表达siRNA的稳定细胞系。最终,将这些胚胎干细胞注入受精卵中,培育出RNAi转基因小鼠。
3. 转基因小鼠的鉴定
通过PCR、Western blot和实时定量PCR等技术手段,证实转基因小鼠的基因组中包含了表达siRNA的外源基因,且该基因能够抑制小鼠中的BMPR-IB基因的表达。同时,还观察到转基因小鼠的生长和发育存在明显异常。
4. 下一步计划
未来计划开展更多的功能实验,以验证BMPR-IB基因在转基因小鼠中的作用,并探究其对小鼠生长发育的影响。同时,还计划扩充样本量,进一步评估RNAi转基因小鼠的可靠性和应用价值。
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