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酵母细胞谷胱甘肽的抽提及分离纯化研究的中期报告 尊敬的评审专家、指导教师： 我是XX大学生物化学专业的研究生，我的研究方向是酵母细胞谷胱甘肽的抽提及分离纯化。现在我向您汇报我的研究的中期进展情况。 一、研究背景和意义 谷胱甘肽（glutathione，GSH）是存在于各种真核生物和原核生物中的一种重要的低分子量三肽，其分子量为307 Da，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成。GSH在生物体内有很多重要的功能，如细胞解毒、氧化还原平衡、氧化应激反应等等。酵母细胞是一种非常重要的研究对象，在生物学和生物化学实验中广泛应用。因此，研究酵母细胞GSH的抽提及分离纯化，对于深入探究其生理功能和应用价值具有重要的理论意义和应用价值。 二、研究内容及方法 1.样品的制备 将大量的酵母细胞（菌种为YY）通过离心分离获得细胞沉淀，经过洗涤后将其加入到低渗盐溶液中，用超声波破碎器进行破碎。破碎后离心去除细胞壁等残渣物质，获得酵母细胞的提取液作为样品。 2.谷胱甘肽的抽提 将获得的细胞提取液用0.1 mol/L的Tris-HCl缓冲液调节pH至7.5，加入液氮储存于-80°C。随后，将冷冻样品迅速化解，离心分离出乳状物，加入2倍体积的酸性醇（50%冰冷TCA及98%冰冷乙醇的1：1混合物），搅拌均匀并浸泡于4°C冷库中过夜，离心分离出TCA沉淀。将TCA沉淀物以10 ml/L的Tris-HCl缓冲液溶解，并经过均相，在0°C下保存。 3.谷胱甘肽的分离纯化 将已制备好的样品溶液加入黄色碘酸钾（KI3）溶液中，经过阳离子交换色谱层析、凝胶过滤层析和高效液相层析等过程，最终得到谷胱甘肽的纯品。 三、研究进展及展望 目前，我已完成了酵母细胞的提取液制备工作，获得了酵母细胞谷胱甘肽的提取液。在此基础上，我进行了谷胱甘肽的抽提，并成功地得到了TCA沉淀。现在，我正在对TCA沉淀物中谷胱甘肽的分离纯化工作中。目前已完成了阳离子交换层析和凝胶过滤层析等步骤，并且获得了较为纯净的目标产物。下一步，我还将进行高效液相层析等工作来纯化谷胱甘肽。 期望通过本研究对谷胱甘肽的分离及纯化方法进行优化，获得高纯度的谷胱甘肽。同时，也期望能够为酵母细胞的研究提供重要的实验数据与理论基础。 谢谢！