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Mre11蛋白相互作用蛋白的筛选及验证的中期报告 Mre11蛋白是参与DNA修复和重组的重要蛋白之一，它在细胞中广泛存在且功能多样。Mre11蛋白与其他蛋白的交互作用对其功能具有重要影响，因此了解其相互作用蛋白是研究Mre11蛋白生物学功能的重要方向。 本研究的目的是筛选和验证与Mre11蛋白相互作用的蛋白。首先利用蛋白质交互作用筛选技术酵母双杂交法（Y2H）筛选Mre11蛋白相互作用的候选蛋白。通过文献调研和分析，选择了多个具有潜在相互作用的蛋白作为筛选目标，包括Rad50和Nbs1等。将这些蛋白构建成与Mre11蛋白互补的酵母双杂交载体pGBKT7-Mre11和pGADT7-Mre11后，经过酵母转化和筛选，成功获得了多个可能与Mre11蛋白相互作用的阳性克隆。 为了验证筛选结果的准确性，将阳性克隆扩增鉴定后进行进一步验证。首先采用荧光共聚焦显微镜观察Mre11蛋白和候选相互作用蛋白在细胞内的共定位情况。结果表明，部分候选蛋白与Mre11蛋白在核内共定位，支持它们存在相互作用。然后利用原位共沉淀实验进一步验证它们的相互作用。将Mre11蛋白与候选蛋白在细胞内共表达后进行共沉淀实验，在Western blot检测中发现多个候选蛋白能够与Mre11蛋白结合。 综上可知，本研究通过酵母双杂交技术初步筛选出多个与Mre11蛋白可能存在相互作用的蛋白，进一步验证结果表明这些候选蛋白与Mre11蛋白存在相互作用。这些结果将有助于深入研究Mre11蛋白的生物学功能及其参与的DNA修复和重组机制。