乙酰胆碱酯酶阳性神经元在鼠脑中的分布和形态特征.docxVIP

乙酰胆碱酯酶阳性神经元在鼠脑中的分布和形态特征 脑内胆碱能机制的研究是目前神经生物学领域的一个相对活跃的课题。由于缺乏理想的显示方法,对中枢胆碱能结构的形态学,远不如单胺类了解清楚。现有资料大多来自乙酰胆碱酯酶(AChE)的组织化学方法研究。AChE在中枢的分布比较广泛,具有ACh上的神经元,并非都是胆碱能的,它们中的一些,既非胆碱能细胞,可能也不是胆碱敏感细胞。这样,AChE作为胆碱能神经元的标志物,其特异性也就受到了怀疑。为了探讨AChE和胆碱能神经元的关系,了解胆碱能神经元的分布,本文应用AChE再生技术,研究AChE阳性神经元在鼠脑的分布和形态特征。 采用dfp注射降低k-b.me 大白鼠30只,体重200～250 g,肌肉注射氟磷酸二异丙脂(di-isopropylfluoropnosphate DFP) 1.2 mg/kg体重。注射后分别存活3、6和10 h,戊巴比妥钠腹腔麻醉后,以生理盐水30 ml(4℃)经心脏灌注,然后灌注10%的中性福尔马林,后固定2 h。再将脑块移入20%蔗糖磷酸缓冲液中过夜。冰冻切片40μm,取切片两套(一套为对照Ⅱ),切片入孵化液孵化2h(40℃)。孵化液组成为乙酰胆碱碘化物(底物)112mg、蒸馏水25 ml、80 mmol/L甘氨酸液12.5 ml、16 mmol/L硫酸铜液12.5 ml、0.1 mol/L醋酸缓冲液50ml、盐酸异