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家蚕转胶蛋白基因的原核表达及功能的初步研究的中期报告
本研究旨在将家蚕转化胶蛋白基因，通过原核表达并进行初步功能研究。目前已完成研究的中期进展如下：
1.基因克隆
采用RT-PCR方法从家蚕幼虫的脂肪体中克隆了胶蛋白基因序列，并将其插入到pET-32a(+)载体中。经过酶切鉴定、测序等步骤，确认所克隆的胶蛋白基因在载体中的正确插入。
2.转化大肠杆菌BL21(DE3)
将重组质粒pET-32a(+)-胶蛋白转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，在IPTG诱导下进行原核表达。经过SDS电泳和Western blot检测，证实胶蛋白基因在大肠杆菌中被成功表达。
3.纯化rBMP
采用Ni2+-NTA亲合层析纯化rBMP，根据电泳和Western blot结果确认纯化后的蛋白质为目标蛋白rBMP。通过对纯化rBMP进行超微结构分析、FTIR光谱检测等方法，初步探究了rBMP的结构特点。
4.初步功能研究
针对rBMP与生物体的相互作用，采用细胞黏附实验和细胞增殖实验，初步研究rBMP对人类肿瘤细胞株U87的影响。实验结果显示，rBMP能够抑制U87细胞的增殖，并使其减小粒径、改变形态。同时，rBMP也能够促进U87细胞对基质的附着和扩展。上述结果表明，rBMP可能具有一定的抗肿瘤活性。
结论：
本研究已完成家蚕转化胶蛋白基因并在原核表达中得到了初步成功，进一步对rBMP进行了初步的结构学和功能学研究。在探索rBMP与细胞的相互作用方面初步发现其抗肿瘤活性，为后续进一步的生物学特性和应用研究奠定了基础。
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