口腔细菌的培养及应用.pptVIP

功能特点 分泌功能 矿化功能 收缩功能 附着能力 再生能力 本文档共149页；当前第94页；编辑于星期二\11点11分 增殖分化影响因素 生长因子 胰岛素 纤维粘连蛋白 抗坏血酸 羟基磷灰石 本文档共149页；当前第95页；编辑于星期二\11点11分 二、唾液腺细胞 本文档共149页；当前第96页；编辑于星期二\11点11分 细胞形态特点 腺泡上皮细胞 导管上皮细胞 肌上皮细胞 本文档共149页；当前第97页；编辑于星期二\11点11分 免疫组织化学染色 腺泡上皮细胞：角蛋白、淀粉酶、对氨基水杨酸、导管上皮膜、 前角蛋白、单克隆角蛋白、分泌成分阳性反应 导管上皮细胞：角蛋白、上皮膜蛋白、磷酸酐酶抗体染色阳性反应 肌上皮细胞： 肌动蛋白、S－100蛋白、肌凝蛋白抗体染色阳性反应 本文档共149页；当前第98页；编辑于星期二\11点11分 功能特点 分泌功能 腺泡细胞：淀粉酶、PRP、唾液过氧化物酶、特异蛋白等 腺泡上皮细胞：顶端分泌、基底及侧膜分泌 导管细胞：胶原 肌上皮细胞：胶原 本文档共149页；当前第99页；编辑于星期二\11点11分 唾液腺细胞的增殖分化 基底潜能干细胞理论 单细胞全能干细胞理论 双细胞亚全能干细胞理论 本文档共149页；当前第100页；编辑于星期二\11点11分 增殖分化功能影响因素 细胞因子 激素 细胞外基质 钙离子 本文档共149页；当前第101页；编辑于星期二\11点11分 三、口腔粘膜细胞 本文档共149页；当前第102页；编辑于星期二\11点11分 培养方法 组织块法 酶消化法 本文档共149页；当前第103页；编辑于星期二\11点11分 细胞形态特点 本文档共149页；当前第104页；编辑于星期二\11点11分 免疫组织化学染色 波形丝蛋白表达阴性 多种角蛋白表达阳性 本文档共149页；当前第105页；编辑于星期二\11点11分 分散组织 机械分离法 消化分离法 本文档共149页；当前第62页；编辑于星期二\11点11分 培养细胞的纯化 人工纯化（酶消化法，机械刮除法，反复 贴壁法，克隆法等） 自然纯化 本文档共149页；当前第63页；编辑于星期二\11点11分 细胞的冻存与复苏 所谓冷冻保存，就是将体外培养物或生物活性材料悬浮在加有或不加冷冻保护剂的溶液中，以一定的冷冻速率降至零下某一温度，并在此温度下对其长期保存的过程。而复苏就是以一定的复温速率将冻存的体外培养物或生物活性材料恢复到常温的过程。不论是微生物、动物细胞、植物细胞还是体外培养的器官都可以进行冻存，并在适当条件下复苏。 本文档共149页；当前第64页；编辑于星期二\11点11分 低温保护剂的应用 在细胞冻存时加入温保护剂，能大大提高冻存效果。 常用的低温保护剂是DMSO，它是一种渗透性保护剂，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而减少冰晶对细胞的损伤。 本文档共149页；当前第65页；编辑于星期二\11点11分 冻存和复苏的原则：慢冻快融 当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。 如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反．结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。 本文档共149页；当前第66页；编辑于星期二\11点11分 常规细胞培养法 本文档共149页；当前第67页；编辑于星期二\11点11分 原代培养 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前称为原代培养。 传代培养 细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器皿中。 本文档共149页；当前第68页；编辑于星期二\11点11分 细胞培养的污染、检测与控制 本文档共149页；当前第69页；编辑于星期二\11点11分 微生物污染 空气、器材、操作、试剂、组织标本 本文档共149页；当前第70页；编辑于星期二\11点11分 微生物污染的检测 细菌和真菌的污染和检测 肉眼直接观察法 培养检查法 显微镜观察法 本文档共149页；当前第71页；编辑于星期二\11点11分 本文档共149页；当前第72页；编辑于星期二\11点