DB45T 2446-2022反季节秀珍菇菌种制备技术规程.docxVIP

ICS 65.020.99 CCS B 39 45 广 西 壮 族 自 治 区 地 方 标 准 DB45/T 2446—2022 反季节秀珍菇菌种制备技术规程 Technical code of practice for process of off-season Pleeurotus pulmonarius culture 2022 - 01 - 26 发布 2022 - 02 - 28 实施 广西壮族自治区市场监督管理局 发 布 DB45/T 2446—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由广西壮族自治区农业科学院提出并宣贯。 本文件由广西农业种植业标准化技术委员会归口。 本文件起草单位：广西壮族自治区农业科学院微生物研究所、玉林市微生物研究所。 本文件主要起草人： 陈雪凤、吴圣进、韦仕岩、卢玉文、郎宁、苏启臣、王灿琴、吴小建、陈国龙。 I 1 DB45/T 2446—2022 反季节秀珍菇菌种制备技术规程 1 范围 本文件界定了秀珍菇、反季节秀珍菇、种源的术语和定义， 规定了制备环境、设施设备要求、质量 要求及种源组织分离、母种复壮与扩繁、原种、栽培种生产、杂菌及害虫的检验判定等各阶段的操作技 术要求。 本文件适用于广西行政区域内反季节秀珍菇菌种的制备。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件； 不注日期的引用文件， 其最新版本（包括所有的修改单） 适用于本 文件。 GB 5749 生活饮用水卫生标准 GB/T 12728 食用菌术语 NY/T 528 食用菌菌种生产技术规程 NY 5099 无公害食品 食用菌栽培基质安全技术要求 3 术语和定义 GB/T 12728界定的以及下列术语和定义适用于本文件。 3.1 秀珍菇 Pleurotus pulmonarius 在分类学上属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属； 中文名： 肺形侧耳种， 商品名或俗 称凤尾菇、秀珍菇。子实体单生或散生，菌盖灰白至灰褐（ 黑）色。 3.2 反季节秀珍菇 off-season Pleurotus pulmonarius 自然条件下冬季出菇的秀珍菇品种， 通过人工调节栽培条件， 能在夏季正常生产或栽培的秀珍菇品 种。 3.3 种源 seed source 从野外或栽培场地采集，可以用来分离提纯繁殖材料的食用菌菌丝、子实体或孢子。 4 菌种制备环境 制备环境应符合NY/T 528的规定，用水应符合GB 5749的规定。 5 设施设备要求 2 DB45/T 2446—2022 5.1 基本设施 冷却室、接种室、培养室应通风、洁净，可控温、控湿。 5.2 主要设备 应具备高压灭菌锅、超净工作台或接种箱、空调、除湿机、培养架、恒温培养箱、冰箱、显微镜等。 生产量大的菌种厂配备搅拌机、 装瓶或装袋机。 6 菌种制作方法 6.1 总体技术要求 总体技术要求如下： a) 接种所需工具及环境要提前灭菌或消毒； b) 采用适宜的培养基； c) 接种操作全程要求无菌操作； d) 繁殖的每批菌种应做好生产记录； e) 菌丝培养期间温差应≤6 ℃; f) 每批菌种应贴有标签。 6.2 种源组织分离方法 6.2.1 种源采集时间 采集时间为5～ 6月，采集第1潮或第2潮菇。 6.2.2 种源要求 选择出菇快、均匀整齐、产量高且菇形完整、无病斑、无虫口、品种特征明显，不含杂质的秀珍菇 子实体。 6.2.3 分离培养基 采用 PSA 加富培养基（见附录 A） 平板进行分离。母种培养基灭菌条件为 0.11 MPa（121℃)下灭 菌 30 min。 6.2.4 切块接种 用75％酒精对种源进行表面消毒后，将种源沿菌柄中心纵向掰成两半，用无菌解剖刀在菌盖与菌柄 交界处中心部位切取（4～ 6） mm×（4～ 6） mm菌肉组织接到平板上，于25 ℃~ 29 ℃恒温培养。 6.2.5 菌种纯化 组织块培养4 d～5 d，长出白色丝毛状菌丝体，检查淘汰有杂菌的菌落 。选取菌丝健壮、 洁白、均 匀的菌落，用接种铲取菌丝前端，移接到PSA综合培养基试管斜面，于27 ℃培养7 d～8 d，选取菌丝健 壮、 洁白、均匀的试管斜面做为母种保存。 6.2.6 出菇试验观测 3 DB4