脂肪酶基因的克隆表达、酶学性质研究和分子改造的中期报告.docxVIP

脂肪酶基因的克隆表达、酶学性质研究和分子改造的中期报告 本次中期报告主要介绍脂肪酶基因的克隆表达、酶学性质研究和分子改造的进展情况。 1. 脂肪酶基因的克隆表达 我们使用PCR技术从人类基因组DNA中克隆了脂肪酶基因，并将其插入表达载体中。经过测序验证，所得基因与已发表的脂肪酶基因序列完全一致。然后，将表达载体转化到大肠杆菌中进行表达。目前已经获得了大量的重组蛋白。 2. 脂肪酶的酶学性质研究 我们对重组脂肪酶进行了初步的酶学性质研究。结果表明，该酶对大多数脂肪酸都具有高度催化活性，而对于一些较短链的脂肪酸则表现出较低的活性。该酶的最适pH在7.5左右，最适温度在50℃左右，表现出一定的热稳定性。 3. 脂肪酶的分子改造 我们计划通过分子改造的手段进一步提高脂肪酶的催化活性和稳定性。目前，已经将已知脂肪酶相关的关键氨基酸序列进行了定点突变，并进行了初步的活性检测。结果表明，其中一些突变型酶的活性有所提高。 综上所述，我们目前已经成功地实现了脂肪酶基因的克隆表达和重组蛋白的制备，并对其进行了初步的酶学性质研究。目前正在进行脂肪酶的分子改造工作，希望能够进一步提高其催化活性和稳定性。