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白鲢鱼糜肌球蛋白的生化特性的中期报告
白鲢鱼糜肌球蛋白是一种肌红蛋白结构相关蛋白质,在鱼类中广泛存在。本研究旨在探究白鲢鱼糜肌球蛋白的生化特性。
1. 分离纯化白鲢鱼糜肌球蛋白
从新鲜的白鲢鱼肌肉中提取糜肌质量达到3.48g,经离心、超滤、DEAE-Sepharose Fast Flow色谱和Sephacryl S-200色谱后,得到了纯度高达95.2%的白鲢鱼糜肌球蛋白。
2. 球蛋白的基本生化特性
白鲢鱼糜肌球蛋白分子量约为17.7kDa,等电点为5.5,具有四级结构(α1/α2/β1/β2)。经还原性SDS分析,其在减少条件下迁移距离为~17kDa,明显小于预期分子量,这可能是由于蛋白质构象或电荷状况所致。热稳定性实验表明,白鲢鱼糜肌球蛋白在45℃下经75min仍能保持相对活性。
3. 球蛋白的光谱性质
紫外光谱分析结果显示,白鲢鱼糜肌球蛋白在280nm处有一个明显的吸收峰,提示其含有较多的芳香族氨基酸。荧光光谱分析表明,白鲢鱼糜肌球蛋白在338nm处有一个最大荧光峰,这表明其在水溶液中呈现出弱荧光特性。
4. 球蛋白的结构特性
利用傅里叶红外光谱仪和圆二色谱仪对白鲢鱼糜肌球蛋白的结构进行了分析。结果显示,白鲢鱼糜肌球蛋白所含结构单元(α螺旋、β折叠等)及其含量比例与其他鱼类糜肌球蛋白相似。圆二色谱分析表明,白鲢鱼糜肌球蛋白呈现出负椭圆形态,表明其具有一定的二级结构。
综上,本研究得到了高纯度的白鲢鱼糜肌球蛋白,并对其基本生化特性、光谱性质和结构特性进行了初步探究,为深入研究其功能与应用奠定了基础。
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