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组织块培养法体外诱导人脂肪干细胞向神经样细胞转化的实验研究的中期报告
组织块培养法是一种能够维持组织原有的细胞微环境,从而保证细胞的生存和功能的体外培养方法。本研究使用组织块培养法培养人脂肪干细胞(ADSCs),并尝试通过体外诱导将其向神经样细胞转化。
在前期研究中,我们成功地分离了ADSCs并进行了特性鉴定,包括细胞形态、表面标记物、多向分化能力以及基因表达谱。接着,我们尝试将ADSCs体外诱导为神经样细胞。首先,我们选用多种神经诱导因子(例如BDNF、NGF、NT-3等)刺激ADSCs,但未能获得明显的神经分化指标,如神经纤维蛋白、βIII-tubulin等的表达。
在中期研究中,我们转向使用化学物质诱导和瞬时转染的方式进行转化。我们筛选了多种神经诱导化学物质(例如壳聚糖、谷氨酸等),最终发现谷氨酸能够显著促进ADSCs向神经样细胞转化,表现为神经纤维蛋白、βIII-tubulin等神经标记物的表达增强,并颜色明显。此外,我们也成功地转染了pEGFP-C1-βIII-tubulin重组质粒至ADSCs中,使其表达βIII-tubulin,并形成了明显的神经样细胞形态。
在下一步主要的研究中,我们将进一步优化转化条件,如诱导时间和浓度,探究转化后细胞的生长特性和细胞学特征,包括神经样细胞的电生理特性等,以验证其作为神经细胞的可行性。
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