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顺铂诱导小鼠胚胎干细胞毒性相关基因的筛选及其初步分析的中期报告
本研究旨在通过顺铂处理小鼠胚胎干细胞 (mESCs) 并筛选其毒性相关基因, 以深入了解顺铂对细胞的影响机制。本报告给出了研究进展的中期结果。
第一步,我们优化了顺铂处理的浓度和时间。实验结果表明,0.5μM的顺铂处理时间为24小时可使mESCs存活率在50%左右,符合我们的研究需求。
第二步,我们利用基因芯片技术对处理前后的mESCs进行了转录组分析。共筛选出29个显著差异表达的基因,其中11个上调,18个下调。通过基因本体论 (GO) 分析,这些差异表达基因主要涉及到细胞周期、DNA损伤和修复等生物学过程。
第三步,我们进行了实时定量 PCR (qPCR) 验证。结果表明,在顺铂处理后,Cdkn1a、Gadd45a、Mdc1 和 Brca1 基因的表达水平明显上调,与基因芯片结果一致。与此同时,Fbxo32、Klf4、Msh2 和 Rad51c 等基因的表达水平则显著下调。
综上所述,通过顺铂诱导mESCs毒性相关基因的筛选及其初步分析,我们鉴定出了一批与细胞周期、DNA损伤和修复等生物学过程密切相关的基因,并初步探讨了顺铂对mESCs的影响机制。这些结果为我们研究顺铂等类似毒性物质的毒理学机制和生物学特性提供了重要的参考。
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