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- 2023-11-06 发布于北京
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蛋白表达纯化实验步骤
蛋白表达纯化实验步骤(待改进)
1、 取 适 当相 应 蛋 白高表 达 的动 物 组 织提
total-RNA 。
2 、 设计蛋白表达引物。引物要去除信号肽,要
加上适当的酶切位点和保护碱基。
3 、RT-PCR ,KOD 酶扩增获取目的基因 c
DNA.
4 、 双酶切,将 cDNA.克隆入 PET28/32 等表达
载体。
5 、 转化到 DH5 α感受态细菌中扩增,提质粒。
6 、将质粒转化入表达菌株,挑菌检测并保种。
表达菌株
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