猪肌内脂肪沉积关键基因的筛选及其新基因pFLJ的功能鉴定的中期报告.docxVIP

猪肌内脂肪沉积关键基因的筛选及其新基因pFLJ的功能鉴定的中期报告 本研究项目旨在筛选猪肌内脂肪沉积关键基因，并对新基因pFLJ的功能进行鉴定。本报告为研究项目进展的中期报告，以下是研究进展的详细介绍： 研究方法 1. 组织采集与RNA提取 在猪体内采集半头长issus肉，并切片，用TRIzol试剂提取总RNA，经纯化后测定RNA纯度和浓度。 2. 建立cDNA文库 将总RNA进行反转录，得到cDNA文库。 3. 基因筛选 采用差异显著性分析筛选出有差异表达的基因。经过实验室测序后，对基因进行注释，确定它们的功能。 4. 基因表达定量分析 利用荧光定量PCR检测差异表达的基因，在多个生物学重复样本中进行表达定量分析。 5. 新基因pFLJ功能鉴定 利用RNA干扰技术或基因编辑技术，靶向干扰或敲除pFLJ基因，比较其对肌内脂肪沉积的影响与野生型猪肉的差异。 研究进展 1. 组织采集与RNA提取 完善了组织采集和RNA提取的技术，得到了高质量的RNA样本。 2. 建立cDNA文库 构建了猪肌内脂肪沉积相关基因的cDNA文库。 3. 基因筛选 筛选了大量的差异表达基因，并对其进行了初步的生物信息学分析。结果表明这些基因主要参与脂肪酸代谢、胰岛素信号传导和线粒体功能等方面。 4. 基因表达定量分析 正在进行基因的表达定量分析，以验证筛选出的差异表达基因。 5. 新基因pFLJ功能鉴定 已经克隆出新基因pFLJ的全长序列，并构建了RNA干扰和基因编辑模型。下一步将进一步对其进行功能鉴定，以确定其在猪肉质中的作用。 总结 本项目正在按照计划有序进行，已经完成了组织采集、RNA提取、cDNA文库建立和基因筛选等步骤。正在进行基因表达定量分析和新基因pFLJ的功能鉴定。我们相信，本研究将为研究猪肉质形成的机制提供新的科学依据。