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- 2023-11-13 发布于上海
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牙乳头干细胞分离、培养的研究的中期报告
本研究旨在探究人类牙乳头干细胞的分离、培养和生物学特性。在研究的前期,我们成功从人类乳牙的牙乳头中分离出了干细胞群。在筛选抗原、形态学和生物学特性等方面的分析中,牙乳头干细胞表达了表面标记CD29、CD44、CD90、CD105、CD106、CD146、STRO1等干细胞特异性标记,同时不表达CD11b、CD19和CD45等负面标记。紫杉醇和5-氟尿嘧啶共同处理后的细胞还原力和增殖活力显著降低,细胞周期和凋亡率均发生了明显变化。
在中期,我们主要集中在牙乳头干细胞的培养和生物学特性的分析。我们用基础培养基将细胞从原本的半黏稠形态变成了长久地维持在培养瓶中的附着生长形态。经过多次细胞传代,并在特定培养基中进行分化,在诱导条件下,牙乳头干细胞可以分化成多种成分细胞。如与钙离子沉积相关的成骨细胞(表达成骨标记碱性磷酸酶、骨钙素、骨桥蛋白),结缔组织细胞 [表达胶原蛋白I、III、纤维素α、分泌谷氨酰胺软骨素(GAGs)]和脂肪细胞(表达脂肪球蛋白和脂肪酸酯酶等标记)。此外还可以在条件培养中分化出表达α-SMA的平滑肌细胞。
此外,我们还研究了牙乳头干细胞的衰老特性和分化功能,结果表明在细胞衰老及分化性能下降时,细胞内的SIRT1、SIRT3和FoxO3a表达显著下降,同时氧化应激、细胞周期调控、细胞间相互作用和能量代谢等通路发生了显著的转化。
综上
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