《植物组织培养技术》教案.docx

PAGE 第三节植物组织培养技术 【学习目标】 1．掌握培养基的配制。 2．掌握植物组织培养过程中各项技能。 3．掌握合理利用激素诱导愈伤组织脱分化、再分化。 【教学地位】 本节涉及到植物组织培养的概念、原理、过程、培养基的配制、组织培养的操作技术等内容，是该章的核心内容之一，是高考中常考的内容。 【教法指导】 1．植物组织培养的过程可用多媒体课件展示。 2．天竺葵的组织培养可直接进入实验室进行实际实验操作。 【新课导入建议】 利用课件向学生展示花卉生产过程，感知组织培养给人们带来的便利。 【课前自主导学】 一 植物组织培养的过程 1．含义 指在无菌和人工控制条件下，诱导离体的植物器官、组织等在适宜的培养条件下发育成完整植株的技术。 2．原理 植物细胞的全能性，是指植物体的每个体细胞都携带着一套来自受精卵的完整基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。 3．植物茎尖组织培养的主要过程 优良母株eq\o――→,\s\u in。灭菌彻底的培养基用于天竺葵的组织培养。 4．取材与接种 1植物组织培养的各项操作均需在无菌室中或超净工作台上进行。 2取天竺葵幼嫩的叶，流水冲净后，消毒并切成约的小块。 3接种在已经配制好的诱导愈伤组织形成的培养基上，做好标记放在适宜条件下培养。 5．观察与记录 每天观察外植体的生长情况，并记录其变化情况。 6．转接幼苗 将增长至一定体积的愈伤组织转接到分化芽的培养基上，在15～25℃、光照强度为1000～2000l的光照培养箱内继续培养。分化出幼芽后，再转接至生根的培养基上。生根后，将试管苗先炼苗，再移栽于大田中。 二、露地栽培 1．一般要经过炼苗驯化的原因 组织培养得到的试管苗植株特点是非常嫩弱，所处的环境是恒温、高湿、弱光、无菌和有完全营养的条件，植株表面没有蜡质和角质层等保护组织，气孔没有关闭功能，有叶绿体但自养能力差。 2．炼苗驯化的步骤 培育壮苗―→洗净琼脂培养基―→选用合适的移植基质―→移栽后条件控制 正误判断： 1．植物组织培养所指的培养条件是指自然环境与无菌。× 【提示】　无菌和人工的控制条件。 2．植物组织培养的依据是植物器官具有全能性。× 【提示】　是植物细胞具有全能性。 3．用作植物组织培养的基本培养基的配方一般要列入所需要的植物激素。√ 4．向MS基本培养基中加入等量的2,4－D和6－BA，可诱导芽的分化。× 【提示】　诱导形成愈伤组织。 【课堂互动探究】 一 植物组织培养 【问题导思】 ①植物组织培养的过程是怎样的 ②植物激素的使用对组织培养有怎样的影响 1植物组织培养基本过程 2生长素和细胞分裂素使用顺序和比例的比较 1使用顺序的比较 使用顺序 实验结果 先使用生长素，后使用细胞分裂素 有利于细胞分裂，但细胞不分化 先使用细胞分裂素，后使用生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高 2使用比例的比较 使用的量及比例 实验结果 比例适中 促进愈伤组织的生长 生长素＞细胞分裂素 有利于根的形成 生长素＜细胞分裂素 有利于芽的形成 例一：2022·仙桃高二测试植物细胞表现出全能性的必要条件是　　 A．给予适宜的营养和外界条件 B．导入其他植物细胞的基因 C．脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件 D．将成熟筛管的细胞核移植到去核卵细胞中 【审题导析】　植物细胞表现出全能性的条件： 1离体条件下。2外部环境条件适宜，如温度、 S培养基的配制和实验操作中的注意事项 【问题导思】　 ①配制MS培养基有怎样的要求 ②如何做到严谨的实验操作 1．MS培养基的配制 1无机营养 ①大量元素：氮N、磷g、硫S等元素。 ②微量元素：铁Fe、铜Cu、钼Mo、锌Zn、锰Mn、钴Co、硼B和碘Ⅰ等。 2有机营养 ①氨基酸：如甘氨酸、丝氨酸及酪蛋白水解的氨基酸作为主要有机氮源。 ②维生素类：常用维生素C、维生素B1、维生素B6、维生素H等，作为早期的生长因子。 ③琼脂除固化培养物外，还有吸附能力。 3植物生长调节物质 植物生长调节物质起关键作用的是生长素、细胞分裂素；二者的比例与使用先后顺序均影响细胞的分裂和分化。 4S固体培养基时先根据进行计算。MS培养基含有种营养成分。其中6种元素属大量元素；8种元素属微量元素，能源物质是。由于菊花的茎段组织培养比较容易，所以不必加。 2将分装好的培养基连同培养器械一起进行灭菌。 3选取菊花的部分进行外植体消毒，在消毒时既要考虑，又要考虑，所以分别用的酒精和的氯化汞溶液消毒，消毒时间不宜过长。 4接种时要特别注意，每瓶接种块外植体。将接完种的锥形瓶放在中培养，培养期间定期消毒。温度控制在℃并每日用日光灯光照12h。 5若干天后发现有的锥形瓶中生长出可爱的菊花幼苗，有的锥形瓶中培养失败还长出很多细菌菌落，试分析其原因。幼苗在移栽入土之前需进行哪些处理工作 【思维导图】 植