第章RNA生物合成和加工.pptVIP

1.? 原核生物RNA的加工 rRNA前体的加工 在原核生物中，rRNA基因与某些tRNA基因组成混合操纵子，可提高效率、节省空间。其它的tRNA基因也成簇存在，并与编码蛋白质的基因组成操纵子，它们在形式多顺反子转录物后，断裂成为rRNA和tRNA的前体，然后进一步加工成熟。 本文档共85页；当前第31页；编辑于星期三\15点37分 E.coli共有三种rRNA 5S、16S 和23S rRNA rRNA原初转录物含6300个核苷酸，约30S。 E.coli有7个rRNA的转录单位（操纵子），它们分散在基因组的各处。每个转录单位由16SrRNA、23SrRNA、5SrRNSA以及一个或几个tRNA基因所组成。每个操纵子中tRNA基因的种类、数量和位置都各不相同。 本文档共85页；当前第32页；编辑于星期三\15点37分 甲基化作用 专一核酸内切酶 30S前体 P16 pre-tRNA P23 专一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 专一核酸外切酶 大肠杆菌rRNA前体的加工 P5 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 甲基化 E III P III III E III 本文档共85页；当前第33页；编辑于星期三\15点37分 原核tRNA前体的加工 E.coli染色体基因组有60个tRNA基因，即某种a.a. 的tRNA基因不只一个拷贝。tRNA基因大多成簇存在， 或与rRNA基因，或与蛋白质基因组成混合转录单位。 tRNA前体加工步骤： 核酸内切酶(RNaseP、RNaseF)在tRNA两端切断。 核酸外切酶(RNaseD)从3’端逐个切去附加序列。 在tRNA3’端加上-CCA-OH。 核苷的修饰（修饰酶):甲基化酶/S-腺苷蛋氨酸（SAM），假尿苷合成酶。 本文档共85页；当前第34页；编辑于星期三\15点37分 tRNA前体分子的加工 a、切除tRNA前体两端多余的序列： 5’—端切除几到10个核苷酸。 b、末端添加：3’-端添加CCA序列。 RNaseF RNaseF RNaseP RNaseP RNaseD RNaseD ACC c、修饰：形成稀有碱基如DH2 。 ? ? ? 表示核酸内切酶的作用 表示核苷酸转移酶的作用 表示核酸外切酶的作用 表示异构化酶的作用 5’ 3’ 本文档共85页；当前第35页；编辑于星期三\15点37分 tRNA+CTP tRNA-C+PPi tRNA-C+CTP tRNA-CC+PPi tRNA-CC+ATP tRNA-CCA+PPi tRNA核苷酰转移酶 tRNA+SAM 甲基-tRNA+S-腺苷高半胱氨酸 tRNA甲基化酶 tRNA假尿苷合成酶催化尿苷的糖苷键发生位移 反应，由尿苷的N1变为C5。 本文档共85页；当前第36页；编辑于星期三\15点37分 2. 真核生物RNA的加工 真核rRNA、tRNA前体的加工过程与原核的很相似，但mRNA的加工过程与原核的有很大不同。 真核rRNA前体的加工 真核生物核糖体 小亚基含：16-18S rRNA 大亚基含：26-28S rRNA、5S rRNA、 5.8S rRNA（特有）。 本文档共85页；当前第37页；编辑于星期三\15点37分 真核rRNA基因拷贝数较多，几十至几千个之间，rRNA基因也成簇排列在一起。 18S、5.8S、28S rRNA基因组成一个转录单位，彼此被间隔区分开，由RNA聚合酶I转录生成一个长的rRNA前体。 5SrRNA基因也成簇排列，间隔区不被转录，由RNA聚合酶III转录后经适当加工。 哺乳动物：45SrRNA前体 含18S、5.8S、 28SrRNA 果蝇：38SrRNA前体 含18S、5.8S、28S rRNA 酵母：37SrRNA 前体，17S、5.8S、26S rRNA 本文档共85页；当前第38页；编辑于星期三\15点37分 rRNA在成熟过程中可被甲基化，位点主要在核糖2’-OH上。真核rRNA甲基化程度比原核的高，约1-2%的核苷酸被甲基化。 真核生物的核仁是rRNA合成、加工和装配成核糖体的场所，大、小亚基分别组装后，通过核孔转移到胞质中参与核糖体循环。 本文档共85页；当前第39页；编辑于星期三\15点37分 真核tRNA前体的加工 真核tRNA基因的数目比原核tRNA的要多的多。例如，E.coli有60个tRNA基因，啤酒酵母250个，果蝇850个，爪