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携带p53基因和Flt3L配体基因的腺病毒载体的构建及鉴定的中期报告 尊敬的评审专家，以下是携带p53基因和Flt3L配体基因的腺病毒载体的构建及鉴定的中期报告： 1. 文献调研 对于本项目所涉及的p53基因和Flt3L配体基因，我们进行了相关文献的调研和阅读。了解到p53是一种重要的抑癌基因，在癌症发生和发展的过程中起到重要的调控作用。Flt3L配体则是一种重要的生长因子，在造血干细胞增殖和分化中发挥着重要作用。通过将这两种基因载入腺病毒向肿瘤细胞中递送，可提高治疗效果。 2. 载体的构建 我们使用了pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP载体作为载体，将p53基因和Flt3L配体基因克隆至该载体中。具体步骤为： （1）将p53基因放入pUC57载体中，并进行限制性酶切。 （2）将Flt3L配体基因放入pUC57载体中，并进行限制性酶切。 （3）将p53基因和Flt3L配体基因分别连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP载体中。 （4）通过PCR和限制性酶切等方法验证构建出的载体是否正确。 3. 载体的包装 我们使用了三种辅助质粒，分别为pMD2.G、pRSV-Rev和pHelper，通过共转染的方式包装出Ad-p53-Flt3L配体载体。具体步骤为： （1）将所需的质粒pCDH-CMV-p53-Flt3L、pHelper、pMD2.G和pRSV-Rev加入培养液中，进行混合并静置。 （2）将混合液转移到293T细胞系正常培养，24小时后更换培养液。 （3）72小时后收集培养液并离心，再通过PEG法沉淀包装出的病毒。 4. 鉴定 通过PCR扩增、限制性酶切和序列分析等方法对包装出的Ad-p53-Flt3L配体载体进行鉴定，结果显示所构建的载体正确无误，可以用于后续实验。 以上是我们的中期报告，谢谢您的关注。