玉米核糖体失活蛋白基因z108在大肠杆菌中的表达及其对病原菌的抗性鉴定的中期报告.docxVIP

玉米核糖体失活蛋白基因z108在大肠杆菌中的表达及其对病原菌的抗性鉴定的中期报告 玉米核糖体失活蛋白基因z108（MaGeZ108）是玉米中的一种重要基因，其编码的蛋白质在核糖体失活过程中发挥重要作用。然而，在细菌中该基因的功能和表达情况尚未得到深入研究。本研究旨在从大肠杆菌中克隆MaGeZ108基因，并研究其在细菌中的表达情况及其对病原菌的抗性机制。 首先，我们通过PCR扩增方式从玉米基因组中克隆了MaGeZ108基因，将其插入到pET-28a载体中。然后，将重组表达质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中，经IPTG诱导后获得了高效表达的融合蛋白。蛋白质分析结果显示，目标蛋白分子量为约30 kDa，符合预期。 接着，我们采用western blotting技术检测了融合蛋白在大肠杆菌中的表达情况。在IPTG诱导后1小时，蛋白质在细菌中高效表达，并且表达量随诱导时间的延长而增加。这表明MaGeZ108基因在大肠杆菌中能够高效表达。 最后，我们进行了对MaGeZ108基因的抗性鉴定实验。将含有MaGeZ108基因的大肠杆菌与一些病原菌如大肠杆菌O157:H7、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌等进行竞争实验。实验结果显示，表达MaGeZ108基因的大肠杆菌能够显著地抑制病原菌的生长，表明MaGeZ108基因对病原菌具有抗性作用。 综上所述，本研究成功从玉米基因组中克隆了MaGeZ108基因，并在大肠杆菌中高效表达。进一步的实验表明，该基因在大肠杆菌中具有对病原菌的抗性作用。这些结果为深入研究MaGeZ108基因的功能和抗性机制提供了基础。