肿瘤药理学实验方法简详解演示文稿.pptVIP

细胞悬液与台盼蓝染色液混匀 后，应在5min内计数完毕，时间过 长，由于细胞活度下降而通透性增 加，从而影响拒染细胞数，因而影 响实验的真实结果。  细胞排染试验注意事项 本文档共73页；当前第30页；编辑于星期一\19点19分  在最适条件下，肿瘤细胞在培养液中随着培养时间延长呈指数生长，以培养时间为横坐标，细胞数的对数为纵坐标作图，可得一条直线，故称此时为对数生长期。随着细胞密度不断增高，由于代谢产物的积聚及营养物的消耗，细胞生长逐渐减慢以致停止，此时称高坪期或稳定期。药物对细胞生长的影响可通过生长曲线反映出来。 实验原理 肿瘤细胞的活性检测 ▲肿瘤细胞生长曲线 本文档共73页；当前第31页；编辑于星期一\19点19分 选取对数生长期的肿瘤细胞，用含10%小牛血清的RPMI1640培养基配成细胞浓度为1×104/ml的细胞悬液分装在培养瓶中，实验组加入不同浓度的被测样品，对照组加入等体积的溶剂。细胞置含37℃、5%CO2的孵箱中培养，在培养后ld、2d、3d、4d、5d、7d各取样，置血细胞计数板中计数，以每毫升细胞数的对数为纵坐标，以时间为横坐标绘制生长曲线（计数法） 。 注意：悬浮细胞同一培养物可连续取样，而贴壁细胞每个培养瓶只能作一次计数，故要计算好需要的细胞瓶数。 实验