谷胱甘肽亲和吸附介质的制备及其对谷胱甘肽硫转移酶的纯化的中期报告.docxVIP

谷胱甘肽亲和吸附介质的制备及其对谷胱甘肽硫转移酶的纯化的中期报告 谷胱甘肽（glutathione，GSH）是一种广泛存在于生物体内的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成。谷胱甘肽在细胞内具有许多重要的生理和生化功能，如抗氧化、解毒、维护细胞内稳态等。 谷胱甘肽硫转移酶（glutathione-S-transferase，GST）是一种含硫转移酶，广泛存在于生物体内。它具有广谱的底物特异性和高度的催化活性，参与细胞中的许多代谢和解毒反应。因此，GST是一种重要的酶，在生物医学和生化研究中得到了广泛的应用。 为了研究GST的结构和功能，需要对其进行纯化和分离。谷胱甘肽亲和吸附介质是一种常用的GST纯化介质，其原理是利用GST与谷胱甘肽的特异性结合，从而实现GST的分离和纯化。 本研究利用手性双交联剂CNBr-Sepharose 4B为母体，通过合成谷胱甘肽与其偶联物的化合物，制备了一种新型谷胱甘肽亲和吸附介质。利用FTIR、UV-Vis、HPLC等方法对该介质进行了表征，并进一步对其对GST的亲和作用进行了研究。 结果显示，制备的新型谷胱甘肽亲和吸附介质具有良好的稳定性和亲和性，可选择性地富集和纯化GST。在室温下，将胞外表达的一种亚型GST置于谷胱甘肽亲和吸附介质中进行纯化，得到了高纯度的GST，其比活力达到了约150 U/mg，纯化倍数为32倍。 综上，本研究成功地制备了一种新型