触酶试验氧化酶试验.docVIP

触酶实验 道理： 触酶又称过氧化氢酶,拥有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,既而形成氧分子,消逝气泡. 方法： 取洁净玻片1张,用接种环挑取细菌,加3％H2O21滴,马上不雅察成就. 成就： 若马上消逝大批气泡为阳性.无气泡为阴性. 运用： 大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性, 故常常运用此实验来判断.别的,金氏杆菌属的细菌也为阴性.分 枝杆菌的鉴别则用耐热触酶实验,结核分枝杆菌为阴性,戈氏分 枝杆菌和地分枝杆菌为阳性. 留神事项： ①3％H2O2溶液要新奇配制.②不宜用血琼脂平板上发展 的菌落,因红细胞含有触酶,可致假阳性反应.③取对数发展期的细菌. 氧化酶实验 1）道理：氧化酶（细胞色素氧化酶）是细胞色素呼吸酶系统的最后呼吸酶. 2）试剂：1%盐酸四甲基对苯二胺或1%盐酸二甲基对苯二胺. 3）方法：常常运用方法有三种; 1）菌落法：直接滴加试剂于被检菌菌落上. 2）滤纸法：取洁净滤纸一小块,沾取菌少量,而后加试剂. 3）试剂纸片法：将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片, 取菌涂于试剂纸上. （4）成就：细菌在与试剂接触10秒内呈深紫色,为阳性.为担保成就的精准性,分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性 对照. 5）运用：重要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别,前者为阴性,后者为阳性.奈瑟菌属.莫拉菌属细菌也呈阳性反应. 2.3耐酸性染色法(萎－倪二氏法) 石炭酸品红染色液碱性品红 95%乙醇10mL5%酚水溶液90mL将品红融化于乙醇中,而后与酚 溶液混淆. 3%盐酸－乙醇浓盐酸3mL95%乙醇97mL 复染液吕氏碱性美蓝染色液.美蓝;95%乙醇30mL;0.01%氢氧化钾溶液100mL;将美蓝融化于乙醇中,而后与氢氧化钾溶液混淆. 染色法 .1将涂片在火焰上加热固定,滴加石炭酸品红染色液,逐渐加热至有蒸气消逝,但切不可使沸腾.染液如因蒸发减少时,应随时增添. 染5min,倾去染液,水洗. .2滴加盐酸－乙醇脱色,直至无红色零落为止(所需光阴视涂片 厚薄而定,一般为1～3min),水洗. .3滴加吕氏碱性美蓝染色液,复染30s～1min,水洗,待干,镜检. 成就：耐酸性细菌呈红色,其余细菌.细胞等物质呈蓝色. 抗酸染色一般步伐 1）初染 用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处逐渐加热,切勿沸腾,消逝蒸汽即暂时分开,若染液蒸发减少,应再加染液,免得枯竭,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲刷. 2）脱色 3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲刷. 3）复染 用碱性美兰溶液复染1分钟,用水冲刷后用吸水纸吸干. 苯酚.美蓝.盐酸四甲基对苯二胺或盐酸二甲基对苯二胺.双氧水