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同济大学 2005
同济大学 2005 至 2006 学年蛋白质化学期末试卷 A
2005~2006《蛋白质化学》考试试题(A 卷)
姓名:
成绩
一、 名词解释(30 分,每题 5 分)1.氨基酸的等电点。2.蛋白质的二级结构3.分子伴侣
一、 名词解释(30 分,每题 5 分)
1.
氨基酸的等电点。
2.
蛋白质的二级结构
3.
分子伴侣
4.
凝胶过滤
5.
亲和层析
6.
双相凝胶电泳
二、 简答题 (40 分,每题 8 分)
1. 写出常见十种氨基酸的结构式、中文名、英文名、三字符号、一字符
号。
2.
遗传密码的特点
3.
固相合成的主要设计思想
4.
简述蛋白质的化学裂解的几种方法
5.
层析的分类和层析技术的基本操作过程
三、 问答题(30 分)
1.
蛋白质的分子结构包括那些?它们测定方法和原理。(18 分)
2.
谈谈对蛋白质化学教学与实验的体会和建议。(12 分)
2005~2006《蛋白质化学》考试试题 A 卷答案
一、
名词解释(30 分,每题 5 分)
氨基酸的等电点(isoelectric point, pI)
在某一 pH 的溶液中,氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等,成为兼性离子,呈电中性。此时溶液的 pH 值称为该氨基酸的等电点。
肽键(peptide bond)是由一个氨基酸的 a-羧基与另一个氨基酸的 a-氨基脱水缩合而形成的化学键。
蛋白质的二级结构
蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,即该段肽链主链骨架原子的相对空间位 置 , 并 不 涉 及 氨 基 酸 残 基 侧 链 的 构 象 。3.分子伴侣分子伴侣是细胞一类保守蛋白质,可识别肽链的非天然构象,促进各功能域和整体蛋白质的正确折叠。
凝胶过滤
凝胶过滤也称为体积排除层析,也可称为分子筛。这类层析的基本原理和吸附或交换无关,它的依据是多孔的载体对不同体积和不同形状分子的排阻能力的不 同,从而对混合物进行分离。通常是分子量大的分子在前,小分子在后;同样分子量的分子,则是线状分子在前,球状分子在后。就这一点而言,凝胶过滤和超离心分析有相似之处。
双相凝胶电泳
等电聚焦/SDS 聚丙烯酰胺双相凝胶电泳(IEF/SDS)分离和分析生物大分子蛋白组份的技术。双相凝胶电泳的分离系统充分应用了蛋白质的两个特性和不同的分离原理。
第一相是根据不同蛋白质所带电荷量的特性,用等电点(pI)聚焦技术分离蛋白质;
第二相是根据不同蛋白质分子量大小的特性,通过蛋白质与 SDS 形成复合物后, 在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的不同分子大小迁移达到分离蛋白质的目的。
二、 简 答 题 (40 分 , 每 题 8 分 ) 1.写出常见十种氨基酸的结构式、中文名、英文名、三字符号、一字符号。
2.遗传密码的特点
连续性:编码蛋白质氨基酸序列的各个三联体密码连续阅读,密码间既无间断也无交叉。
简并性:遗传密码中,除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外,其余氨基酸有 2、3、4 个或多至 6 个三联体为其编码。
通用性:蛋白质生物合成的整套密码,从原核生物到人类都通用。
摆动性:转运氨基酸的 tRNA 的反密码需要通过碱基互补与 mRNA 上的遗传密码反向配对结合,但反密码与密码间不严格遵守常见的碱基配对规律,称为摆动配对3.固相合成的主要设计思想是:先将所要合成肽链的羧末端氨基酸的羧基以共价键的结构同一个不溶性的高分子树脂相连,然后以此结合在固相载体上的氨基酸作为氨基组分经过脱去氨基保护基并同过量的活化羧基组分反应接长肽键。这样的步骤可以重复地多次进行下去,即缩合洗涤-去保护-中和和洗涤-下一轮缩合,最后达到所需要合成的肽链长度。
4 简述蛋白质的化学裂解的几种方法
裂解在甲硫氨酸(Met)
裂解于半胱氨酸(Cys
裂解于色氨酸(Trp) 4.部分酸水解
层析的分类和层析技术的基本操作过程 a.吸附层析 离子交换层析;层析聚焦,巯基交换层析
亲和层析;兔疫亲和层析,凝集素亲和层折,染料结合层析
疏水层析;(4)配位鳌合层析,金属鳌合层析,组氨酸配基层析b.分配层析
c.凝胶过滤
层析技术的基本操作过程
依据某种原理选择一种可以分离所要研究分子的基质,即是所谓的固定相。
将所要研究的分子转移到基质上,并以适当的条件,也就是选择一定的流动相,使所研究分子在基质上展开,展开的方法因所用的基质不同而不同。
将展开的结果用一些方法显示或记录。三、 问答题
蛋白质的分子结构包括那些?它们测定方法和原理(18 分) 一级结构(primary structure), 蛋白质测序仪。
二级结构(secondary structure), CD
三级结构(tertiary structure), X 衍
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