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- 2023-11-26 发布于上海
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MACC1基因对胃癌细胞株BGC-823基因表达的影响的中期报告
MACC1基因被发现与多种恶性肿瘤的发生和发展密切相关,其中包括胃癌。本实验旨在研究MACC1基因对胃癌细胞株BGC-823基因表达的影响。已完成的实验内容和结果如下:
1.构建MACC1基因的表达载体:将MACC1基因克隆到表达载体pEGFP-C1中,转化至大肠杆菌中进行扩增,酶切和纯化。酶切和DNA测序验证表达载体成功构建。
2.转染表达载体至BGC-823细胞株:BGC-823细胞株分为三组,分别转染空白质粒、pEGFP-C1-MACC1和pEGFP-C1-MACC1-siRNA,转染48小时后,检测BGC-823细胞株的转染效率,绿色荧光显示转染成功。
3.检测MACC1基因对BGC-823细胞株的影响:使用Western blot检测MACC1蛋白表达水平,发现转染MACC1表达载体的BGC-823细胞株中,MACC1蛋白表达水平明显升高;转染MACC1-siRNA表达载体的BGC-823细胞株中,MACC1蛋白表达水平显著下降。同时,将各组细胞株分别进行细胞增殖和细胞凋亡检测,结果显示,转染MACC1表达载体的BGC-823细胞株中,细胞增殖速度明显加快,而转染MACC1-siRNA表达载体的BGC-823细胞株中,细胞增殖速度明显下降,细胞凋亡明显增加。
综上所述,本实验初步证明MACC1基因对BGC-
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