病原性真菌检验 临床微生物学.pptxVIP

弧菌和弯曲菌 医学检验系临床微生物及免疫学教研室 井申荣 第一部分 弧 菌 概 述 • 弧菌科（Vibrionaseae）包括一群氧化酶阳性、具有端 极鞭毛、动力阳性的细菌，有4个菌属，其中，弧菌属 是一群氧化酶阳性，发酵葡萄糖，对弧菌抑制剂O/129 （二氨基二异丙基喋啶）敏感的细菌。 • 弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界，尤以水中为多，有 100多种。主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血弧菌（致病 性嗜盐菌）。前者引起霍乱；后者引起食物中毒。 霍乱弧菌 霍乱弧菌（V.cholera ）是人类霍 乱的病原体，霍乱是一种古老且流行 广泛的烈性传染病之一。曾在世界上 引起多次大流行，主要表现为剧烈的 呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属 于国际检疫的烈性传染病。 • 霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（ Classical biotype ）和埃尔托生物型（ EL-Tor bio-type ）。 这两种 型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同， 在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来， 全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌， 第七次病原是埃尔托型所致。 1992年10月在印度东南部又发现了一个引 起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它 引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古 典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧 菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活 时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为 引起世界性霍乱流行的新菌株。 一、生物学性状 （一）形态染色 • 霍乱弧菌呈弧形或逗点形态，大小为 1.4~2.6×0.5~0.8μm 。革兰氏阴性菌，菌体一端 有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。 • 取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可 见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。 图注：霍乱弧菌的鞭 毛(↑)和它可溶解 的鞘膜(↑↑) 负染， ×3 100 图注：分裂中的 霍乱弧菌 冰冻蚀 刻， ×70 000 （二）培养特性 • 霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌; • 营养要求不高，耐碱，不耐酸，在pH8.8～9.0的碱性 性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这 一pH不易生长，故，碱性蛋白胨水可作为选择性增 增殖霍乱弧菌的培养基; • 在碱性平板上菌落直径为2mm ，圆形，光，滑，透 透明。 • 常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼 琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌 落，因，发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。 （三）生化反应 • 两个生物型的霍乱弧菌都能分解甘露醇、葡萄糖、蔗 糖、麦、芽糖，产，酸不产气。迟。缓发酵乳糖，不分解 阿拉伯糖。 • 氧化酶、明胶酶试验均阳性。 • 能产生靛基质，霍，乱红反应阳性 ElTor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌 菌生化反应有所不同 • ElTor型V－P试验为阳性，能产生强烈的溶血素， 溶解羊红细胞，在，血平板上生长的菌落周围出现 明显的透明溶血环， • 古典型试验V－P试验为阴性，不溶解羊红细胞。 • 个别ELTor型霍乱弧菌株亦不溶血。 霍乱弧菌的抗原结构 特性 O抗原 H抗原 属共同抗原 + 群特异性 + - 型特异性 + - 耐热性 （100℃ 2h） + - （四 ）抗原性1 ．抗原 原结构： 2 ．分群和分型： . 根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个血清群。 . 根据是否与O1抗血清凝集分两大群， 凡能与O1群抗血清发生凝集的称为O1群霍乱弧菌； 凡不被O1群抗血清凝集的其它血清群统称为非O1群霍乱弧 弧菌。 O1群霍乱弧菌的血清分型 型别 别名 O抗原成份 原型 稻叶型（Inaba） A 、C 异型 小川型（Ogawa） A 、B 中间型 彦岛型 （Hikojima） A 、B 、C 血清型： O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A 、B 、C三个抗原成 份组成 • 生物型：O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1Tor生 生物型之分，两，个生物型具有相同的血清型。 我国流行以ElTor、小、川型霍乱弧菌为主。 • 噬菌体分型：对噬菌体的敏感性进行分型，其，中 中较为实用的是第Ⅳ组和第 Ⅴ组噬菌体。 霍乱弧菌两个生物型的鉴别 性 状 古典型 E1 Tor 型 溶血（1%绵羊红细胞） - d 血凝（2.5%鸡红细胞） - + V-P试验 - + 多粘菌素B敏感试验( 50U/片） + - 噬菌体Ⅳ组裂解( 106/ml） + - 噬菌体Ⅴ组裂解( 106/ml） - + + 9 0 % 以上为阳性；；- 9 0 % 以上为阴性； d 1 0 - 8 9 % 阳性 霍乱弧菌的变异性 形态变异 弧型→直杆状→ 多形 菌落变异 S ←→R←→L 溶血性变异( E