高效液相色谱法培训课件2.pptVIP

为何如此重要？ 五个小肽的5ng进样，好的色谱系统非常容易鉴别出所有峰。在不好的色谱系统中，第一个峰则消失在基线噪音中。 本文档共101页；当前第58页；编辑于星期六\18点48分 基线噪音对积分的影响 1.224 1.183 1.183 Caffeine @ 271 nm 本文档共101页；当前第59页；编辑于星期六\18点48分 色谱柱 色谱柱有柱管和固定相组成，柱管用不锈钢制成，柱长10～30cm，内径2～6mm，以4.6mm的内径最常用。 根据键合基团极性不同，化学键合相可分为非极性、中等极性和极性三类。 常用色谱柱有： ODS柱、氰基柱、氨基柱等 本文档共101页；当前第60页；编辑于星期六\18点48分 非极性键合相 表面基团为非极性烃基，如C18 、C8等，主要用于RP色谱。 C18是最常用的非极性键合相，将十八烷基氯硅烷与硅胶表面的硅醇基经多步反应而成。 R1，R2 =H，Cl ， CH3 1（2，3）：1 本文档共101页；当前第61页；编辑于星期六\18点48分 根据R1、R2基团，含碳量可分为高碳、中碳、低碳型键合相： 高碳 R1=R2 =CH3 载样量大，吸附性能大； 中碳 R1=H, ≡Si－O－ Si(H) －C18H37 R2 =Cl ≡Si－O 低碳 R1=R2