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细菌性突发公共卫生事件 的实验室检验技术 上海市临 检验中心 陈悦 细菌性突发公共卫生事件分类 • 细菌性呼吸道疾病 :群体性发热 • 细菌性食源性疾病 :食物中毒 • 细菌性生物恐怖事件 :炭疽白粉事件 细菌性呼吸道疾病 • 流行性脑脊髓膜炎(简称流脑) • 链球菌病(猩红热 、人感染猪链2病) • 肺鼠疫 • 土拉热（弗朗西斯菌） • 肺炭疽 • 军团菌病 检验样本的选取原则 根据病情的发展,本菌可相继存 在于鼻咽腔 、肺泡灌洗液 、血液、 淤血点及脑脊液等标本中 ， 在实 验室检测中应取相应检材 标本的检验意义 • 脑脊液 、血液 、皮肤粘膜出血点挤出液、 肺泡灌洗液中检出病原菌可直接作为确诊 依据 • 咽拭子 一般是对健康人群或病人密切接触 者进行带菌检验时采集 ， 对病人如采集此 标本 ， 在诊断上仅有参考价值 CSF标本的采集 • 脑脊液(CSF)： 是用于分离和鉴定病原体最好 的标本 • 取CSF2～3ml ， 注入无菌试管内 ， 3000转/分， 离心20分钟 ， 用无菌吸管取沉淀物直接接种 • CSF沉渣还可涂片 ， 作G染色镜检 • CSF离心后的上清液供做血清学检查特异性抗 原和（或） DNA特异片段 ， 以对病人进行早期 快速诊断 血标本的采集 • 在疾病早期 ， 病人高热时采取静脉血 ， 及时 分离纯培养物供鉴定 • 留2ml血注入无菌试管内分离血清 ， 胶乳凝 集试验检查特异抗原 、PCR测DNA特异片段 和ELISA测急性期抗体 • 在病人病后1～2周采取第二次血液2ml ， 分 离血清检查病人恢复期抗体以作追溯性诊断 出血点渗出液标本的采集 • 选择新出现的皮疹 ， 以75%酒精消毒局部皮 肤 ， 用无菌针头挑破淤点或淤斑 ， 轻轻地 挤出组织液 • 用无菌毛吸管吸取渗出液先增菌后分离 、 培养 • 将渗出液涂片 ， 作G染色镜检 咽拭子标本的采集 • 采样时 ， 令受检者尽量张开口 ， 用压舌板 将其舌头轻轻压下 ， 用前端略向上弯曲45 度角的无菌棉拭子探入口腔内悬雍垂后面 的鼻咽孔部位 ， 小心涂抹该部粘膜数次 ， 然后小心退出 ， 注意尽量不接触口腔其余 部位 • 咽拭子直接接种到选择性平皿分离病原菌 样品的处理和运送 • 及时处理样品： 采集样品后应尽可能地做 到床边接种 ， 若无可能则应在最短地时间 内送至实验室进行接种培养 • 早期采集样品： 应尽可能采集病人用药前 的早期样品 ， 可以明显提高病原菌的检出 水平 • 保温运送： Nm对温度较为敏感 ， 应保持样 品处于20 C～36 C之间 ， 切不能低温运送 （检测抗体的血清标本除外） 细菌性生物恐怖事件 • 炭疽白粉事件： 直接吸入导致肺炭疽 • 病原体： 毒力型炭疽杆菌 ， 即含有毒素质 粒（pxo1） 和荚膜质粒（pxo2） 的菌株 （ tox+cap+） • 并不是要从分类学的角度去决定一种细菌 是不是炭疽芽孢杆菌 ， 或蜡样芽孢杆菌的 炭疽亚种 ， 而是这种细菌能不能引起炭疽 疾病 。而炭疽疾病的决定因素是那两个质 粒上的致病基因 ， 缺一不可 细菌性食源性疾病 • 由细菌通过摄食而进入人体的 ， 使人 体患感染性或中毒性的一类疾病 。属 食源性疾病范畴 ， 主要包括细菌性肠 道传染病和细菌性食物中毒 细菌性肠道传染病 • 属我国法定传染病 ， 主要包括霍乱、 痢疾 、伤寒 、副伤寒及新近参照传染 病管理的由肠出血性大肠埃希菌O157 引起的出血性肠炎 细菌性食物中毒 • 人体摄入了被细菌或其毒素污染的食 品后所出现的非传染性急性 、亚急性 疾病 各类样品采集方法（ 1） • 粪便 、肛拭： 粪便标本应尽量在病程早期和治 疗前采集 ， 同时应采集新鲜粪便 ， 选取有脓血 、 粘液部分3-5克 、水样便取含絮状物的2-5ml ， 盛 于无菌容器中及时送检 。若无法获得粪便时 ， 可 用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4- 5cm深处（小儿2-3cm） ， 轻轻转动一 圈 ， 擦取直 肠表面的黏液后取出 ， 盛入运送培养基或保存液 中送检 。注意为保证多个检验项目的开展 ， 同一 病人应至少采集2支肛拭 各类样品采集方法（2） • 呕吐物： 直接放入无菌容器中及时送检 • 咽拭样品： 采集时应将棉签檫拭咽喉及扁 桃体红肿处（特别是白膜处） ， 然后将棉 签插入4-5ml生理盐水中 ， 尾部弃去 • 血液： 采集患者急性发病期（3天内） 和恢 复期（2周左右） 各3ml全血分离血清送检 检验项目 • 霍乱弧菌 、副溶血弧菌及其它致病性弧菌、 金黄色葡萄球菌 、蜡样芽胞杆菌 、沙门菌、 变形杆菌 、致泻性大肠埃希菌 、空肠弯曲